研究課題/領域番号 |
17H03924
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研究機関 | 京都大学 |
研究代表者 |
宮沢 孝幸 京都大学, ウイルス・再生医科学研究所, 准教授 (80282705)
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研究分担者 |
上田 真保子 東海大学, マイクロ・ナノ研究開発センター, 特定研究員 (60760353)
入江 崇 広島大学, 医系科学研究科(医), 准教授 (70419498)
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研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | ネコ白血病ウイルス / グリカン / レトロウイルス / ワクチン / コアラレトロウイルス |
研究実績の概要 |
ネコ白血病ウイルス(feline leukemia virus:FeLV)は猫に免疫不全や白血病を引き起こす。猫はFeLV感染後数年でほとんどが死に至るため、FeLV感染症は獣医臨床上大きな問題となっている。FeLVに対するワクチンは90年代から市販されているものの感染防御能は低い。感染防御能の低さは、ワクチンが中和抗体を誘導しにくいことによるが、その原因はFeLVの外被糖タンパク質のグリカン(糖鎖)にある。本研究ではグリカンによって隠されていた中和エピトープを露出させたシュードタイプウイルスを作製し、感染防御能の高いFeLVワクチンを作出することを目的とする。 コアラレトロウイルス(koala retrovirusu:KoRV)は、FeLVと同じガンマレトロウイルス属に分類され、FeLV-AならびにFeLV-Bと同じ受容体を利用する。FeLVとKoRVの共通性に注目し、グリカンによって隠される中和エピトープの解析を行うこととした。国内で飼育されているコアラ2頭の血液からPBMCを分離し、HEK293T細胞と共培養した。長期間培養の後、ゲノムDNAを抽出し、PCR法によりKoRVを検出したところ、2頭中1頭でKoRV-B陽性であった。このサンプルからKoRV-Bの配列をクローニングし、KoRV-B分子クローンを構築した。この分子クローン(KoRV-B_koron18)についてHEK293Tを用いたマーカーレスキューアッセイを行った結果、KoRV-B_koron18は感染性を有していた。KoRV-B_koron18はFeLV-Aと受容体干渉することを確認した。KoRV-Bのエンベロープタンパク質にも糖鎖修飾部位が多数存在していた。抗原予測を行った結果、KoRV-Bもグリカンによりエピトープが隠されている可能性が示唆された。
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現在までの達成度 (段落) |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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今後の研究の推進方策 |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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