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2019 年度 実績報告書

CO2固定酵素ルビスコの機能発現最適化による光合成の機能改良

研究課題

研究課題/領域番号 17H03964
研究機関神戸大学

研究代表者

蘆田 弘樹  神戸大学, 人間発達環境学研究科, 准教授 (50362851)

研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2021-03-31
キーワードルビスコ / 光合成 / CO2固定 / シアノバクテリア / アーキア
研究実績の概要

好熱性ルビスコの高いCO2/O2反応比特異性の原因を明らかにするために、アミノ酸配列と立体構造の相同性・類似性が非常に高い好熱性シアノバクテリアThermosynechococcus elongatusのルビスコと常温性Synechococcus elongatus PCC7942のルビスコを研究対象とした。シアノバクテリアルビスコは、ラージサブユニット8個とスモールサブユニット8個が会合した16量体で機能するが、好熱性シアノバクテリアルビスコのCO2/O2反応比特異性が高い原因構造を解析するために、両野生型ルビスコおよび両ルビスコのスモールサブユニットを入れ替えたスワップ型の好熱性ラージサブユニット/常温性スモールサブユニット、常温性スモールサブユニット/好熱性スモールサブユニットの構造活性相関解析を行った。その結果、常温性スモールサブユニット/好熱性スモールサブユニットのスワップ型ルビスコは常温性ルビスコ野生型よりもCO2/O2反応比特異性が高くなり、逆に好熱性ラージサブユニット/常温性スモールサブユニットのスワップ型ルビスコが好熱性野生型よりもCO2/O2反応比特異性が低くなった。このことから、好熱性ルビスコの高機能性にスモールサブユニットが大きく関与していることを明らかにした。また嫌気性アーキアのルビスコは、非常に高いO2反応性を示し、CO2固定能が低く、ルビスコのCO2/O2反応比特異性を決定するメカニズムを明らかにする好材料として、本研究で注目している。このルビスコの酵素特性を解析した結果、非常に失活し易いことが分かった。この原因は、他生物ルビスコよりも活性化状態が不安定で、CO2による長時間の活性化を必要とすることだと明らかになった。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

研究実績の概要に記載したように、ルビスコのCO2固定反応およびO2反応性決定に関与する構造を明らかにするという本研究の目的に対して、その構造を明らかにしたことから、おおむね順調に進展していると自己評価した。

今後の研究の推進方策

今後の研究の推進方策としては、好熱性シアノバクテリアと常温性シアノバクテリアのルビスコ スモールサブユニッ
トの比較から、好熱性ルビスコにおいて高いCO2/O2反応比特異性を可能にする構造を同定する。また、高いO2反応性を示すアーキアのルビスコの詳細な酵素解析を行い、ルビスコのO2反応性のメカニズムを解析する。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Revisiting the methionine salvage pathway and its paralogues2019

    • 著者名/発表者名
      Sekowska Agnieszka、Ashida Hiroki、Danchin Antoine
    • 雑誌名

      Microbial Biotechnology

      巻: 12 ページ: 77~97

    • 査読あり / 国際共著
  • [雑誌論文] Reaction of ribulose biphosphate carboxylase/oxygenase assembled on a DNA scaffold2019

    • 著者名/発表者名
      Dinh Huyen、Nakata Eiji、Lin Peng、Saimura Masayuki、Ashida Hiroki、Morii Takashi
    • 雑誌名

      Bioorganic & Medicinal Chemistry

      巻: 27 ページ: 115120~115120

    • 査読あり
  • [学会発表] 好熱性と常温性シアノバクテリアRuBisCOの構造活性相関研究2020

    • 著者名/発表者名
      河野飛鳥、磯野香奈子、合田初奈、林美彩希、蘆田弘樹
    • 学会等名
      日本農芸化学会2020年度大会

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公開日: 2021-12-27  

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