包括的１細胞遺伝子解析法を用いた自己免疫性肝疾患の病理学的解析

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H04058
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 原田 憲一 金沢大学, 医学系, 教授 (30283112)
• 研究分担者: 橋本 真一 和歌山県立医科大学, 和歌山県立医科大学 先端医学研究所, 教授 (00313099)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 病理 / 原発性胆汁性胆管炎 / 1細胞遺伝子解析 / 肝疾患

研究実績の概要

本年度は、原発性胆汁性胆管炎 (PBC)２症例から得られたシングルセルデータに加えオープンアクセスとして近年公表されたシングルセルトランスクリプトームデータ（GSE: gene expression omnibus series, no.115460, 124395, 125449, 130473, 136103）5セットを用いて統合的解析を行った。具体的には、PBC肝における構成細胞種を同定・比較し、疾患特異的な細胞動態の解析、さらに肝のシングルセルのメタデータとしても利用し、胆管細胞や肝細胞の性質、また疾患を特徴付けるマーカー遺伝子について解析し下記の結果を得た。
１. 疾患特異的病態：疾患・サンプル間を越えて共通の性質を持つ細胞型とその亜型が見られた。特に制御性T細胞がPBC肝で増加していること、またPBCの１症例でマクロファージ由来のケモカイン(CCL8など)産生が強かった。
２. メタデータとして標的分子および各細胞型の解析：シングルセルレベルにおいても肝臓を構成する肝細胞のゾーネーションが確認された。また胆管細胞には４種類タイプが同定された。すなわち①粘液を産生する成熟胆管細胞の他、前駆細胞マーカーを発現する細胞ので②肝細胞マーカーの発現が弱く胆管細胞マーカーの発現がやや強いもの③肝細胞マーカーの発現が強く胆管細胞マーカーの発現が弱いもの④どちらも弱いが前駆細胞マーカーの発現がやや強いものに分けられた。さらに胆管細胞癌においても類似の層別化ができ、正常胆管細胞と類似した細胞分化の違いが示唆された。また、遺伝子レベルでは胆管細胞は全般的にvimentinを発現しており、相関解析では特に間葉系関連のマーカー遺伝子群との関連が示唆された。最後にKRT7陽性肝細胞では胆管細胞のマーカー遺伝子の発現が強い傾向にあり、胆管への形質転換を示唆する肝細胞集団であることが示唆された。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Expression of fatty-acid-binding protein 5 in intrahepatic and extrahepatic cholangiocarcinoma: the possibility of different energy metabolisms in anatomical location (2020)
  • 著者名/発表者名: Risa Nakagawa, Nguyen Canh Hiep, Hirofumi Ouchi, Yasunori Sato, Kenichi Harada
  • 雑誌名: Medical Molecular Morphology 巻: 53 ページ: 42-49
  • DOI: https://doi.org/10.1007/s00795-019-00230-9
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Serum C16:1n7/C16:0 ratio as a diagnostic marker for nonalcoholic steatohepatitis (2019)
  • 著者名/発表者名: Kazutoshi Yamada, Eishiro Mizukoshi, Takuya Seike, Rika Horii, Takeshi Terashima, Noriho Iida, Masaaki Kitahara, Hajime Sunagozaka, Kuniaki Arai, Tatsuya Yamashita, Masao Honda, Toshinari Takamura, Kenichi Harada and Shuichi Kaneko
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology and Hepatology 巻: - ページ: -
  • DOI: doi:10.1111/jgh.14654
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Challenges of Primary Biliary Cholangitis: What is new and what needs to be done (2019)
  • 著者名/発表者名: Benedetta Terziroli Beretta-Piccoli, Ehud Zigmond, ME Gershwin,Kenichi Harada , et al.
  • 雑誌名: J Autoimmunity 巻: 105 ページ: 102328
  • DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaut.2019.102328
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] 脂肪肝・NASHの肝組織診断 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一 吉村かおり
  • 雑誌名: Medical Practice 巻: 36(9) ページ: 1361-1366
• [雑誌論文] Lymphoid organとしての肝臓 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 雑誌名: 臨牀消化器内科 巻: 34(5) ページ: 471-480
• [雑誌論文] 自己免疫性肝疾患からの肝細胞癌 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一、吉村 かおり
  • 雑誌名: 消化器・肝臓内科 巻: 5(5) ページ: 537-545
• [学会発表] Classification of intrahepatic cholangiocarcinoma microenvironment based on immune cell and tumor stromal features (2019)
  • 著者名/発表者名: Nguyen Canh Hiep、Kenta Takahashi, Kosaka Kazuto, Yasunori Sato, Kenichi Harada.
  • 学会等名: EASL
  • 国際学会
• [学会発表] EFFICACY AND SAFETY OF E6011,ANTI-HUMAN FRACTALKINE MONOCLONAL ANTIBODY, INPATIENTS WITH PRIMARY BILIARY CHOLANGITIS WITH AN INCOMPLETE RESPONSE TO URSODEOXYCHOLIC ACID:A PLACEBO-CONTROLLED DOUBLE-BLIND COMPARISON PHESE 2 STUDY (2019)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Tanaka, Masabiru Abe, Tadashi Namisaki, Shinji Shimoda, Mikiko Zeniya, Akio Ido, Hitoshi Yoshiji, Hiromasa Ohira, Kenichi Harada, Yuko Kakuda, Atsushi Umeda, Yuki Kamiya, Yukari Higasine, Seiichiro Hojo, Toshio Imai, Tetsu Kawano, Yasuni Nakanuma, Hirohito Tsubouchi.
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2019
  • 国際学会
• [学会発表] IDENTIFICATION OF NOVEL BILIARY EPITHELIAL CELL BIOMARKERS IN PRIMARY BILIARY CHOLANGITIS(PBC) (2019)
  • 著者名/発表者名: Shinji Shimoda, Kenichi Harada, minoru Nakamura, M Eric Gershwin
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2019
  • 国際学会
• [学会発表] Pathology of biliary diseases (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第１０８回日本病理学会総会 2019年度病理診断講習会 系統的：胆道の病理
  • 招待講演
• [学会発表] 胆管癌の鑑別診断および分類におけるCD239の有用性の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: Nguyen Canh Hiep、髙橋健太、山村美奈子、佐藤保則、Minoru Tanaka、原田憲一
  • 学会等名: 第１０８回日本病理学会総会
• [学会発表] 自己免疫性肝炎―最近の知見― (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第１０８回日本病理学会総会
• [学会発表] 胆管癌における選択的CDK阻害薬の抗腫瘍効果の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 山村 美奈子、佐藤 保則、佐々木 素子、原田 憲一
  • 学会等名: 第１０８回日本病理学会総会
• [学会発表] 当院における胆管癌発生危険因子についての検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 筒井朱美 佐藤保則 妹尾知典 永野拓也 馬場伸介 高口浩一 原田憲一
  • 学会等名: 第105回日本消化器病学会
• [学会発表] 新たなPBC治療標的分子の同定と治療へのアプローチ (2019)
  • 著者名/発表者名: 下田 慎治、 原田 憲一、 中村稔
  • 学会等名: 第５５回日本肝臓学会総会
• [学会発表] 日本人の原発性胆汁性胆管炎におけるthe UDCA response scoreの有効性の検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 川田 一仁、 城下 智、 原田 憲一
  • 学会等名: 第５５回日本肝臓学会総会
• [学会発表] 疾患模倣培養系を用いた網羅的遺伝子発現解析とゲノムワイド関連解析（GWAS）を統合したPBC病態分子メカニズムの解明 (2019)
  • 著者名/発表者名: 下田 慎治、 原田 憲一、 中村 稔
  • 学会等名: 第５６回日本消化器免疫学会総会
• [学会発表] シングルセル解析による原発性胆汁性胆管炎の解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 髙橋 健太、岩淵 禎弘、 橋本 真一、 原田 憲一
  • 学会等名: 第５６回日本消化器免疫学会総会
• [学会発表] 胆管癌におけるCDK発現の意義と選択的CDK阻害薬の抗腫瘍効果についての検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 山村 美奈子、髙橋 健太、佐藤 保則、佐々木 素子、原田 憲一
  • 学会等名: 第51回日本臨床分子形態学会・学術集会
• [学会発表] 当院での薬物性肝障害に対する臨床病理学的検討-免疫チェックポイント阻害剤による肝障害に着目して- (2019)
  • 著者名/発表者名: 筒井 朱美、原田 憲一、妹尾 知典、 永野 拓也、 高口 浩一、 中沼 安二
  • 学会等名: 第51回日本臨床分子形態学会・学術集会
• [学会発表] 急性発症自己免疫性肝炎の臨床病理学的検討 肝細胞型薬物性肝障害との鑑別に注目して (2019)
  • 著者名/発表者名: 筒井 朱美、高口 浩一、原田 憲一
  • 学会等名: JDDW2019 第27回日本消化器関連学会週間
• [学会発表] Molecular mechanism of cholangiopathy in PBC (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: PBCミニシンポジウム～Eric Gershwin教授を囲んで～
  • 招待講演
• [学会発表] 自己免疫性肝炎に関する病理学的挑戦 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 沖縄県肝臓懇話会特別講演会
  • 招待講演
• [学会発表] NASH/NAFLDの病理診断 (2019)
  • 著者名/発表者名: 原田 憲一
  • 学会等名: 第23回福島肝疾患勉強会
  • 招待講演