B型肝炎ワクチン応答とHBV排除の免疫ゲノム解析に基づくキャリア化阻止戦略の構築

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H04168
• 研究機関: 国立研究開発法人国立国際医療研究センター
• 研究代表者: 考藤 達哉 国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, 研究センター長 (80372613)
• 研究分担者: 西田 奈央 国立研究開発法人国立国際医療研究センター, その他部局等, 上級研究員 (50456109) ; 田中 純子 広島大学, 医系科学研究科(医), 教授 (70155266) ; 小松 陽樹 東邦大学, 医学部, 准教授 (80424711)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: B型肝炎ワクチン / 母子感染 / 水平感染 / 免疫 / 遺伝要因 / ウイルスゲノム / カンボジア / 乾燥濾紙血法（DBS）

研究実績の概要

HBワクチンによるHBs抗体誘導機序を明らかにするために、B型肝炎患者のPBMCを用いてHBs抗原・HBc抗原特異的B細胞の検出系を確立した。濾胞性ヘルパーT細胞（TFH）-B細胞系列を効果的に活性化する免疫アジュバントの探索を目的として、健康成人・B型慢性肝炎患者のPBMCからTFHを誘導するIn vitro培養系を樹立した。TLRリガンドによる形質細胞様樹状細胞の賦活がTFH誘導に重要であり、アジュバントとして期待できることを明らかにした。
カンボジア4,541人を対象にした乾燥濾紙血法(DBS)による検討ではHBs抗原陽性率は小児0.5%、母親4.7%であった。HBs抗原陽性/HBV DNA陽性の母70名と児12名に関する系統樹解析では、genotype C（80.49％）をカンボジア全体で認め、genotype B（19.51％）はベトナムとの国境近傍に認めた。S遺伝子変異を伴う17名の母親から出生した児のうち、HBワクチン接種既往がある児12名にはS遺伝子変異を認めず、接種既往がない児５名にはS gene 変異を認めた。
カンボジア人HBV感染患者497検体からDBS法で抽出したゲノムDNAを用いて、HLA-DPB1タイピング（PCR-Luminex法）及び疾患関連遺伝子（CXCL13等）SNPsのタイピングを実施した。疾患抵抗性アリルHLA-DPB1*04:01と、疾患感受性アリルHLA-DPB1*13:01を同定した。疾患関連SNPsは有意な差を認めなかった。
HBワクチンによる母子感予防不成功2家族において、臍帯と爪からHBVワクチンエスケープ変異株を検出した。HBVキャリア児に対するペグインターフェロン療法施行中のサイトカイン動態を検討した。著効例は非著効例と比べて血清CXCL9, 10, 11, 13が治療開始24週までに高値を示す傾向があることを見出した。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [国際共同研究] WHO カンボジア/カンボジア王国保健省(カンボジア)
  • 国名: カンボジア
  • 外国機関名: WHO カンボジア/カンボジア王国保健省
• [国際共同研究] CDC(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: CDC
• [国際共同研究] ヴィントン医科大学(ベトナム)
  • 国名: ベトナム
  • 外国機関名: ヴィントン医科大学
• [雑誌論文] A prospective trial of vaccine to prevent hepatitis B virus reactivation after hematopoietic stem cell transplantation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Nishikawa K, Kimura K, Kanda Y, Sugiyama M, Kakihana K, Doki N, Ohashi K, Bae SK, Takahashi K, Ishihara Y, Mizuno I, Onishi Y, Onozawa M, Onizuka M, Yamamoto M, Ishikawa T, Inoue K, Kusumoto S, Hashino S, Saito H, Kanto T, Sakamaki H, Mizokami M.
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1038/s41409-020-0833
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of the efficiency of dried blood spot-based measurement of hepatitis B and hepatitis C virus seromarkers (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto C, Nagashima S, Isomura M, Ko K, Chuon C, Akita T, Katayama K, Woodring J, Hossain MS, Takahashi K, Tanaka J
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 10 ページ: 3857
  • DOI: 10.1038/s41598-020-60703-1.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Discordance of hepatitis B vaccination policies for healthcare workers between the USA, the UK, and Germany (2020)
  • 著者名/発表者名: Komatsu Haruki、Klenerman Paul、Thimme Robert
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 50 ページ: 272～282
  • DOI: 10.1111/hepr.13470
  • 査読あり
• [雑誌論文] Existence of hepatitis B virus surface protein mutations and other variants: demand for hepatitis B infection control in Cambodia (2020)
  • 著者名/発表者名: Ko K, Takahashi K, Nagashima S, Yamamoto C, Ork V, Sugiyama A, Akita T, Ohisa M, Chuon C, Shafiqul Hossain M, Mao B, Tanaka J,
  • 雑誌名: BMC Infectious Disease 巻: 20 ページ: 305
  • DOI: 10.1186/s12879-020-05025-3.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Immune Determinants in the Acquisition and Maintenance of Anti-HBs in Adults After First-Time Hepatitis B Vaccination. (2019)
  • 著者名/発表者名: 3.Doi H, Yoshio S, Yoneyama K, Kawai H, Sakamoto Y, Shimagaki T, Aoki Y, Osawa Y, Yoshida H, Kanto T
  • 雑誌名: Hepatology Communications 巻: 3 ページ: 812-824
  • DOI: 10.1002/hep4.1357.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Hepatitis B surface antigen seroprevalence among pre- and post-vaccine cohorts in Cambodia, 2017 (2019)
  • 著者名/発表者名: Ork V, Woodring J, Shafiqul Hossain M, Wasley A, Nagashima S, Yamamoto C, Chuon C, Sugiyama A, Ohisa M, Akita T, Ko K, Mao B, Tanaka J
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 37 ページ: 5059-5066
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2019.06.073
  • 査読あり
• [雑誌論文] Acquisition rate of antibody to hepatitis B surface antigen among medical and dental students in Japan after three-dose hepatitis B vaccination (2019)
  • 著者名/発表者名: Nagashima S, Yamamoto C, Ko K, Chuon C, Sugiyama A, Ohisa M, Akita T, Katayama K, Yoshihara M, Tanaka J
  • 雑誌名: Vaccine 巻: 37 ページ: 145-151
  • DOI: 10.1016/j.vaccine.2018.11.019
  • 査読あり
• [雑誌論文] High possibility of hepatocarcinogenesis in HBV genotype C1 infected Cambodians is indicated by 340 HBV C1 full-genomes analysis from GenBank. (2019)
  • 著者名/発表者名: Chuon C, Takahashi K, Matsuo J, Katayama K, Yamamoto C, Ko K, Hok S, Nagashima S, Akbar SMF, Tanaka J
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: 12186
  • DOI: 10.1038/s41598-019-48304-z
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] POGLUT1, the Putative Effector Gene Driven by rs2293370 in Primary Biliary Cholangitis Susceptibility Locus Chromosome 3q13.33. (2019)
  • 著者名/発表者名: Hitomi Y, Ueno K, Kawai Y, Nishida N, et al.
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: 102
  • DOI: 10.1038/s41598-018-36490-1.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] NFKB1 and MANBA Confer Disease Susceptibility to Primary Biliary Cholangitis via Independent Putative Primary Functional Variants. (2019)
  • 著者名/発表者名: Hitomi Y, Nakatani K, Kojima K, Nishida N, Kawai Y, Kawashima M, Aiba Y, Nagasaki M, Nakamura M, Tokunaga K.
  • 雑誌名: Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 巻: 7 ページ: 515-532
  • DOI: 10.1016/j.jcmgh.2018.11.006.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Integrated GWAS and mRNA Microarray Analysis Identified IFNG and CD40L as the Central Upstream Regulators in Primary Biliary Cholangitis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ueno K, Aiba Y, Hitomi Y, Shimoda S,et al.
  • 雑誌名: Hepatology Communication 巻: 4 ページ: 724-738
  • DOI: 10.1002/hep4.1497
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Liver disease secondary to congenital heart disease in children. (2019)
  • 著者名/発表者名: Komatsu H, Inui A, Kishiki K, Kawai H, Yoshio S, Osawa Y, Kanto T, Fujisawa T.
  • 雑誌名: Expert Rev Gastroenterol Hepatol. 巻: 49 ページ: 651-666
  • DOI: 10.1080/17474124.2019.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Loss of fibrocystin promotes interleukin-8-dependent proliferation and CTGF production of biliary epithelium. (2019)
  • 著者名/発表者名: Tsunoda T, Kakinuma S, Miyoshi M, Kamiya A, Kaneko S, Sato A, Tsuchiya J, Nitta S, Kawai-Kitahata F, Murakawa M, Itsui Y, Nakagawa M, Azuma S, Sogo T, Komatsu H, Mukouchi R, Inui A, Fujisawa T, Nakauchi H, Asahina Y, Watanabe M.
  • 雑誌名: Journal of Hepatology 巻: 71 ページ: 143-152
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2019.02.024.
  • 査読あり
• [学会発表] Increased frequency of PD-1+CD57+Siglec-7-dysfunctional NK cells in patients with non-alcoholic fatty liver disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, Yoshio S, Kanto T.
  • 学会等名: The 10th Asia-Pacific Primary Liver Cancer Expert Meeting,
  • 国際学会
• [学会発表] Sphingosine-1-phosphate as a mediator of peripheral-dominant liver fibrosis in mice model of congestive hepatopathy. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kawai H, Osawa Y, Sakamoto Y, Tsutsui Y, Yamazoe T, Mori T, Yoshikawa S, Yoshio S, Kanto T.
  • 学会等名: The 1st JSH International Liver Conference
  • 国際学会
• [学会発表] Macrophages and NK cells as a source of biomarkers in patients with NAFLD. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kanto T
  • 学会等名: The 1st JSH International Liver Conference
  • 国際学会 / 招待講演
• [学会発表] Siglec-7 as an indicator of dysregulated NK cells and macrophage inflammation in patients with non-alcoholic fatty liver disease. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto Y, Yoshio S, Kawai H, Mori T, Aoki Y, Yoshida Y, Arai T, Itokawa N, Osawa Y, Taketomi A, Kanto T.
  • 学会等名: AASLD 2019
  • 国際学会
• [学会発表] Impact of metabolic stress on the pathogenesis of autoimmune liver disease in subjects bearing missense variant of negative immune regulator Lnk/Sh2b3. (2019)
  • 著者名/発表者名: Taizo Mori, Sachiyo Yoshio, Michitaka Matsuda, Yuzuru Sakamoto, Tomonari Shimagaki, Hironari Kawai, Yosuke Osawa, Tatsuya Kanto.
  • 学会等名: International Liver Conference (ILC) 2019
  • 国際学会
• [学会発表] Epidemiological Assessment of the interventions for elimination of mother-to-child transmission of hepatitis B virus in Japan, (2019)
  • 著者名/発表者名: Tanaka J, Sugiyama A, Ko K, Yamamoto C
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2019
  • 国際学会
• [学会発表] Development of a dried blood spot-based host genome analysis method for hepatitis B-related genes and its clinical application in Cambodia. (2019)
  • 著者名/発表者名: Setoyama H, Nishida N, Tanaka J, Mizokami M, Sasaki Y, Kanto T.
  • 学会等名: AASLD The Liver Meeting 2019
  • 国際学会
• [学会発表] 18 years follow-up large cohort study on epidemiology of hepatitis C among hemodialysis patients, their long-term prognosis and related risk factors (2019)
  • 著者名/発表者名: Ko K, Nagashima S, Yamamoto C, Akita T, Ohisa M, Sugiyama A, Katayama K, Takahashi K, Tanaka J,
  • 学会等名: 25th International Symposium on Hepatitis C virus and Related Viruses(HCV2019)
  • 国際学会
• [学会発表] Host factors associated with HBV related HCC in Asian populations (2019)
  • 著者名/発表者名: Nao Nishida, Masaya Sugiyama, Hiromi Sawai, Yong Poovorawan, Katsushi Tokunaga, and Masashi Mizokami
  • 学会等名: AASLD Meeting 2019
  • 国際学会
• [備考] 肝炎・免疫研究センター 肝疾患研究部
  • URL: http://www.ncgmkohnodai.go.jp/kanen_meneki/index.html
• [産業財産権] B型肝炎ワクチンに対する免疫応答性に関わる遺伝子 (2019)
  • 発明者名: 西田奈央、溝上雅史、徳永勝士
  • 権利者名: 西田奈央、溝上雅史、徳永勝士
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2019-200888