ヒトiPS細胞から誘導した機能的気道線毛上皮細胞シートの作製

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H04183
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 伊藤 功朗 京都大学, 医学研究科, 講師 (40447975)
• 研究分担者: オケヨ ケネディオモンディ 京都大学, ウイルス・再生医科学研究所, 講師 (10634652)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: メッシュシート / 培養 / 肺胞上皮

研究実績の概要

メッシュシートを用いた上皮シート作成技術確立の一環として、マウスの初代上皮細胞を用いた肺胞上皮のin vitroモデル作成を行った。マウス肺からトリプシンとエラスターゼに処理により上皮細胞を単離した。フィーダー細胞株と共培養し、ヒト細胞における治験と同様に倍加時間が約2.7日の高効率増殖を確認した。また、フィーダーを除去し一般の液体培地に継代すると増殖が速やかに停止することから、不可逆性の不死化(腫瘍化)ではなく培養条件による可逆性の増殖亢進であると考えられた。マウス肺の初代上皮細胞の旺盛な増殖はフィーダーとの共培養下に限定されており、NCI-H441ではみられたようなグリッドに定着した少数の上皮細胞の増殖によるシート形成は得られなかった。マトリゲル溶液を真空乾燥させることにより約5マイクロ・メートルの均一な薄膜を作ることに成功した。さらにこれをパラホルムアルデヒド溶液処理することにより培養基質として十分な強度を得た。この上にマウス肺上皮細胞の気液界面培養を行い、細胞シートの統合性が維持されていることを確認した。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] The utility of serial procalcitonin measurements in addition to pneumonia severity scores in hospitalized community-acquired pneumonia: A multicentre, prospective study. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ito A, Ito I, Inoue D, Marumo S, Ueda T, Nakagawa H, Taki M, Nakagawa A, Tatsumi S, Nishimura T, Shiota T, Ishida T.
  • 雑誌名: Int J Infect Dis 巻: 92 ページ: 228, 233
  • DOI: 10.1016/j.ijid.2020.01.018
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cefepime vs. meropenem for moderate-to-severe pneumonia in patients at risk for aspiration: An open-label, randomized study. (2020)
  • 著者名/発表者名: Oi I, Ito I, Tanabe N, Konishi S, Hamao N, Yasutomo Y, Kadowaki S, Hirai T.
  • 雑誌名: J Infect Chemother 巻: 26 ページ: 181, 187
  • DOI: 10.1016/j.jiac.2019.08.005.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Induction of airway remodeling and persistent cough by repeated citric acid exposure in a guinea pig cough model. (2019)
  • 著者名/発表者名: Cui S, Ito I, Nakaji H, Iwata T, Matsumoto H, Oguma T, Tajiri T, Nagasaki T, Kanemitsu Y, Izuhara H, Mishima M, Niimi A.
  • 雑誌名: Respir Physiol Neurobiol 巻: 263 ページ: 1, 8
  • DOI: 10.1016/j.resp.2019.02.002.
  • 査読あり
• [雑誌論文] In Vitro Disease Modeling of Hermansky-Pudlak Syndrome Type 2 Using Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Alveolar Organoids. (2019)
  • 著者名/発表者名: Korogi Y, Gotoh S, Ikeo S, Yamamoto Y, Sone N, Tamai K, Konishi S, Nagasaki T, Matsumoto H, Ito I, Chen-Yoshikawa TF, Date H, Hagiwara M, Asaka I, Hotta A, Mishima M, Hirai T.
  • 雑誌名: Stem Cell Reports 巻: 12 ページ: 431, 440
  • DOI: 10.1016/j.stemcr.2019.01.014.
  • 査読あり / オープンアクセス