B系列決定必須転写因子EBF1欠損をレスキューするmicroRNAの発見

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H04212
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 幸谷 愛 東海大学, 医学部, 教授 (00517477)
• 研究分担者: 穂積 勝人 東海大学, 医学部, 教授 (30246079) ; 伊川 友活 東京理科大学, 研究推進機構生命医科学研究所, 教授 (60450392) ; 大塚 正人 東海大学, 医学部, 教授 (90372945)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: B細胞分化 / EBF1 / microRNA

研究実績の概要

miR-195がEBF1欠損造血前駆細胞におけるB細胞欠損をレスキューすることを、E B F１欠損造血前駆細胞にmiR-195をレトロウィルスによって導入し、T細胞B細胞を持たない免疫不全マウスに骨髄移植する系で証明してきたが、より、確実性の高い方法で上記の現象を明らかにするために、miR-195トランジェニックマウスを作成し、miR-195 Tg
とvav-CreマウスとEBF1 flox KOマウスの交配を行った。交配が終了したマウスに対して、解析を行ったところ、骨髄においてCD19陽性細胞が認められたため、EBF1欠損マウスで認められるB細胞欠損をmiR-195がレスキューすることが、改めて証明された。また上記細胞に対してATAC-seqを行ったところ、B細胞運命決定で重要とされる転写因子のプロモーター領域においてEBF1欠損細胞ではクローズしているクロマチン領域がmiR-195ではオープンになっていることが明らかになった。
しかしながら、マウスが不妊となり、マウスの数を増やしての上記の確認が不能となった。この理由としては、Vav-Creが生殖系列にリークしていることが考えられた。そこで、現在戻し交配を行い、Vav-CreとEBF1 flox ヘテロマウスでの交配を進めている。
miR-195欠損マウスにおいてリンパ球分化、B細胞分化に異常が認められており、トランスジェニックマウスの結果を支持する結果が得られた。
再現性が認められ次第論文化の予定である。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] PD-L1 is induced on hepatocyte surface via CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 6 upregulation by the anti-HBV drug Entecavir (2020)
  • 著者名/発表者名: 1)Yamamoto Y, Kakisaki M,Kotaki R, Kurosaki N, Chiba T, Ando K,Shimizu T,Aoki T, Chamoto K,Kagawa T, *Kotani A
  • 雑誌名: International Immunology 巻: in press ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Dasatinib exacerbates splenomegaly of mice inoculated with Epstein-Barr virus-infected lymphoblastoid cell lines. (2020)
  • 著者名/発表者名: 2)Kotaki R, Kawashima M, Yamamoto Y, Higuchi H, Nagashima E, Kurosaki N, Takamatsu M, Kikuti YY, Imadome KI, Nakamura N, *Kotani A.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 10(1): ページ: 4355
  • DOI: doi: 10.1038/s41598-020-61300-y.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] .Butyric Acid in Saliva of Chronic Periodontitis Patients Induces Transcription of the EBV Lytic Switch Activator BZLF1: A Pilot Study. (2020)
  • 著者名/発表者名: Koike R, Nodomi K, Watanabe N, Ogata Y, Takeichi O, Takei M, Kaneko T, Tonogi M, Kotani A, Imai K
  • 雑誌名: In Vivo. 巻: 34(2) ページ: 587-594
  • 査読あり
• [雑誌論文] PD-L1/L2 protein levels rapidly increase on monocytes via trogocytosis from tumor cells in classical Hodgkin lymphoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kawashima M, Carreras M, Higuchi H, Kotaki R, Hoshina T, Kawai Y, Okuyama K, Suzuki N, Kakizaki M, Miyatake Y, Ando K, Nakayama M, Umezu S, Horie R, Higuchi Y, Katagiri K, Goyama S, Kitamura T, Chamoto K, Yano S, Nakamura N, and * Kotani A.
  • 雑誌名: Leukemia 巻: Feb24 ページ: -
  • DOI: doi: 10.1038/s41375-020-0737-9.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Increased granulopoiesis in the bone marrow following Epstein-Barr virus infection (2019)
  • 著者名/発表者名: Katahira Y, Higuchi H, Matsushita H, Yahata T, Yamamoto Y, Koike R, Ando K, Sato K, Imadome KI, *Kotani A.
  • 雑誌名: Sci. Rep. 巻: 9(1) ページ: 13445
  • DOI: doi: 10.1038/s41598-019-49937
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] EBV LMP1 in Gingival Epithelium Potentially Contributes to Human Chronic Periodontitis via Inducible IL8 Production. (2019)
  • 著者名/発表者名: Watanabe N, Nodomi K, Koike R, Kato A, Takeichi O, Kotani AI, Kaneko T, Sakagami H, Takei M, Ogata Y, Sato S, Imai K.
  • 雑誌名: In Vivo. 巻: 33(6) ページ: 1793-1800.
  • 査読あり