幹細胞白血病の分子病態と分化・増殖制御

2018 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H04227
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 野阪 哲哉 三重大学, 医学系研究科, 教授 (30218309)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: MLL-ENL / 白血病幹細胞 / Eya2 / 自己複製

研究実績の概要

我々はMLL-ENL誘導発現型トランスジェニックマウスを用いた解析から自己複製関連遺伝子PLZFの下流遺伝子としてハエの眼の発生に関与するEya2を同定し、Eya2が PLZFによる造血幹・前駆細胞の不死化のみならず、急性前骨髄球性白血病の原因遺伝子であるPLZF-RARAやPML-RARAによるがん化においても重要な役割を担うことを明らかにしてきた。今回、小児白血病の中で最も予後不良な疾患のひとつとされる、t(17;19)(q22;p13)急性リンパ性白血病の原因遺伝子であるE2A-HLFの下流でもEya2の高発現が見られることを見出し、E2A-HLFで不死化したマウス骨髄細胞においてshRNAによるノックダウン実験などを行った結果、白血病幹・前駆細胞の自己複製においてEya2が重要な役割を担っていることを明らかにした（Maharjan BD et al., Int J Oncol 54: 981-990, 2019）。
エピゲノム修飾遺伝子Tet1のコンディショナルノックアウトマウス（当研究室で独自に作製）とMLL-ENL誘導発現型トランスジェニックマウスを用いた交配実験の方は、骨髄移植実験と組み合わせることによって、MLL-ENLによる白血病幹細胞生成・白血病発症の際、Tet1の有無で造血細胞分化段階特異的に表現型が有意に変わるという興味深い現象が観察された。現在、littermate controlを用いて再現性の確認を慎重に行っている。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

Eya2関連実験は留学生の出産による産休などで、やや控えめに進行したが、復帰後は、おおむね順調である。 　Tet１関連実験の方は、誘導発現トランスジェニックマウスとコンディショナルノックアウトマウスの交配実験において非常に興味深い成果が得られつつあり、現在、littermate間での厳密な比較による確認を行っている。本科研費により新たに技術補佐員を雇用することができたので、マウスの維持、交配、骨髄移植実験、FACS解析など、研究代表者と連携研究者のみでは全てを実施することが困難だった実験も比較的着実に進行している。しかしながら、全体的に見ると、複雑な交配過程を伴うマウス表現型の再現性の確認などに予想外に時間がかかり、エピジェネティクス解析が遅れている感は否めない。

今後の研究の推進方策

Eya2関連の方は上流分子による遺伝子発現調節機構やEya2自身による自己複製への関与をさらに明確にすることよって白血病幹細胞生成機構の全容解明に少しでも近づけたい。 　Tet1関連の方は、標的遺伝子を絞った後、Tet1によるそのエピジェネティクス調節を中心に詳細な解析を行い、Tet1の新たな生理・病理機能を探索しながら白血病幹細胞生成の全容解明につなげていきたい。

研究成果

• [雑誌論文] Eya2 is critical for E2A-HLF-mediated immortalization of mouse hematopoietic stem/progenitor cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Maharjan BD, Ono R, Nosaka T.
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 54 ページ: 981-990
  • DOI: 10.3892/ijo.2019.4673.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Nucleocytoplasmic shuttling of the human parainfluenza virus type 2 phosphoprotein. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohtsuka J, Matsumoto Y, Ohta K, Fukumura M, Tsurudome M, Nosaka T, Nishio M.
  • 雑誌名: Virology 巻: 528 ページ: 54-63
  • DOI: 10.1016/j.virol.2018.12.005.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] The hemagglutinin-neuraminidase (HN) head domain and the fusion (F) protein stalk domain of the parainfluenza viruses affect the specificity of the HN-F interaction. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsurudome M, Ohtsuka J, Ito M, Nishio M, Nosaka T.
  • 雑誌名: Front Microbiol 巻: 9 ページ: 391
  • DOI: 10.3389/fmicb.2018.00391.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Immunological association of inducible bronchus-associated lymphoid tissue organogenesis in Ag85B-rHPIV2 vaccine-induced anti-tuberculosis mucosal immune responses in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagatake T, Suzuki H, Hirata S, Matsumoto N, Wada Y, Morimoto S, Nasu A, Shimojou M, Kawano M, Ogami K, Tsujimura Y, Kuroda E, Iijima N, Hosomi K, Ishii KJ, Nosaka T, Yasutomi Y, Kunisawa J.
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 30 ページ: 471-481
  • DOI: 10.1093/intimm/dxy046.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Immunological association of inducible bronchus-associated lymphoid tissue organogenesis in Ag85B-rHPIV2 vaccine-induced anti-tuberculosis mucosal immune responses in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagatake T, Suzuki H, Kawano M, Ogami K, Tsujimura Y, Kuroda E, Iijima N, Hosomo K, Ishii KJ, Yasutomi Y, Kunisawa J, (non-JSI member contributors: Hirata S, Nosaka T).
  • 学会等名: 第47回 日本免疫学会
• [備考] 三重大学大学院医学系研究科 感染症制御医学・分子遺伝学分野
  • URL: http://www.medic.mie-u.ac.jp/microbiol/