| 研究課題/領域番号 |
17H04261
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
原田 浩 京都大学, 生命科学研究科, 教授 (80362531)
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| 研究分担者 |
子安 翔 京都大学, 生命科学研究科, 招へい研究員 (80781913)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | がん / 低酸素応答 / 抗酸化能 / 放射線抵抗性 |
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| 研究実績の概要 |
「HIF-1と我々が見出した新規遺伝子による糖代謝経路のリプログラミングが、抗酸化物質の産生を介して放射線抵抗性を誘導する」可能性を検証した。まず初めに、HIF-1と当該新規遺伝子の恒常活性化型変異体によってDNA損傷の発生頻度が低下するかを、DNA二重鎖切断検出用レポーター遺伝子（53BP1-EGFP発現ベクター）を用いて検証した。また、細胞の放射線抵抗性への影響を検証する目的で、Clonogenic Cell Survival Assayを実施した。これらの実験を実施した際、解糖系律速酵素、ペントースリン酸回路構成因子、グルタミノリシス律速酵素などの発現をノックダウンする遺伝子操作を加え、放射線抵抗性の獲得における当該糖代謝経路の重要性を検証した。以上の実験により、放射線抵抗性を克服する為に標的とすべき代謝パスウェイを同定した。
平成29年度に構築した「当該新規遺伝子の過剰発現ベクター」、および申請者らが持つ「HIF-1依存的に発光・蛍光蛋白質を発現するレポーター遺伝子」を、がん細胞株のゲノムDNA上に安定に導入した。得られた細胞を免疫不全マウスに移植して固形腫瘍を準備した。移植腫瘍を対象に当該遺伝子がHIF-1活性や腫瘍増殖に及ぼす影響を、インビボで解析した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初計画通りに研究を進めることができたから
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでに準備した研究資材を活用し、研究の完結に向けてデータの蓄積を図る。
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