研究課題
特定遺伝子において片アリルのみでの発現を引き起こすゲノム刷り込み現象では、その制御の基盤に刷り込み制御領域「ICR」のアリル特異的DNAメチル化がある。我々は、Igf2/H19刷り込み遺伝子座のICR（H19 ICR）において、精子で確立されたメチル化が、受精後に父由来アリルのみで維持される際に、単なる維持メチル化だけでなく、アリル特異的な新規メチル化もおこっていることを見いだしていた。受精後にアリルを見分けて、父方ICRのみを新規DNAメチル化するためには、生殖細胞で、DNAメチル化以外のエピジェネティック修飾も付加されていると考えられる。そこで、精子におけるクロマチン状態をクロマチン免疫沈降法により解析した。また、H19 ICR配列が、上述の受精後父由来特異的新規DNAメチル化を受けるには、H19 ICR配列の上流末端側約500 bpの範囲が必要であることがわかっていた。そこで、同領域の活性の十分性を再構築実験により検証した。λファージ由来配列にCTCF結合配列とSox-Octモチーフを挿入した人工断片は、トランスジーンとしてマウスに導入すると、父・母どちらから受け継がれても低メチル化となる（刷り込み制御に不十分）。しかし、これに、H19 ICR上流末端500 bp配列を付加し、トランスジェニックマウスを作製した結果、受精後に父由来のみでメチル化されるようになることがわかった。
3: やや遅れている
精子クロマチン解析の精度を上げるために、クロマチン免疫沈降の改良法の導入をおこなった。
受精後アリル特異的メチル化に必要・十分であることがわかった、H19 ICRの上流末端500 bpを中心に、改良法による精子クロマチン解析をおこなう。
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Epigenetics & Chromatin
巻: 11 ページ: 36
10.1186/s13072-018-0207-z
