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2019 年度 実績報告書

カイコにおける胚休眠制御カスケードの全容解明

研究課題

研究課題/領域番号 17H05047
研究機関東京大学

研究代表者

木内 隆史  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 助教 (60622892)

研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
キーワードカイコ / 休眠 / ゲノム編集 / トランスクリプトーム / ChIP-seq
研究実績の概要

胚休眠制御カスケードの全容を解明するために、下記の5つの課題に取り組み成果を得た。
1. 私たちが同定したZ染色体上に座乗する休眠制御遺伝子Lmは転写因子をコードしていた。本研究ではLm制御下にある遺伝子を同定するためにChIP-seqを行う予定だったが、そのためにLm遺伝子の上流あるいは下流にFLAGタグを導入したノックイン(KI)カイコを作出する必要があった。前年度に引き続きCRISPR/Cas9システムを用いてKIを試みたが、KIカイコを得ることができなかった。
2. Lm発現部位におけるトランスクリプトームを把握するために、Lm遺伝子の下流にEGFP遺伝子を導入したKIカイコを作出しようとしたができなかった。
3. Lmと同じシステムに関与する5つの遺伝子についてノックアウト(KO)カイコを作出し、休眠性への影響を評価した。すると、4つのKOカイコにおいて休眠性がLmと同様に変化した。この結果により、Lmの転写因子としての機能よりは、Lmが関与するシステムそのものが休眠性を制御しているとする新規の知見が得られた。
4. pndおよびpnd-2遺伝子は、胚子が休眠に入るときに機能する遺伝子である。しかし、その分子機能は未知である。2018年度までに行った正常カイコと各KOカイコの比較トランスクリプトーム解析により、各遺伝子に制御される遺伝子群の全容を把握した。2019年度は、同様の時期に機能する遺伝子l-nの分子実体を明らかにするとともに、KOカイコのトランスクリプトーム解析を行った。
5. ヤママユガ科であるシンジュサンの蛹休眠を制御する遺伝子を同定するために、非休眠性のエリサンを繰り返し戻し交雑することで作出した休眠エリサン系統のゲノム配列を解析し、制御遺伝子の候補を得ている。候補遺伝子は他のチョウ目昆虫で保存されている一方、エリサンでは機能欠損が疑われる変異が存在した。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2019 その他

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (2件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] CRISPR/Cas9-mediated somatic mutation of the sex-linked translucent (os) gene in the silkworm, Bombyx mori.2019

    • 著者名/発表者名
      Tomihara K, Satta K, Shimada T, Kiuchi T.
    • 雑誌名

      Journal of Insect Biotechnology and Sericology

      巻: 88 ページ: 31-38

    • DOI

      10.11416/jibs.88.2_031

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 時計遺伝子のノックアウトがカイコの休眠性へ与える影響2019

    • 著者名/発表者名
      飛田永・勝間進・木内隆史
    • 学会等名
      令和2年度 蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
  • [学会発表] カイコ第4褐卵(b-4)変異体の責任遺伝子の同定2019

    • 著者名/発表者名
      富原健太・薩た克也・勝間進・木内隆史
    • 学会等名
      令和2年度 蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
  • [備考] 昆虫遺伝研究室ホームページ

    • URL

      https://sites.google.com/view/igblab-ut-aba/top

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公開日: 2021-01-27  

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