| 研究課題/領域番号 |
17H05097
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
赤崎 幸穂 九州大学, 大学病院, 助教 (60568963)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 変形性関節症 |
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| 研究実績の概要 |
本研究の平成30年度の課題は、平成29年度までに同定したヒト早期軟骨変性の疾患関連因子の培養軟骨細胞における機能解析とノックアウトマウスの作成によるin vivoにおける機能解析である。protein quality control（autophagy、proteasomeシステム、小胞体ストレスなど）の異常に関連するdecidual protein induced by progesterone (DEPP)および慢性炎症のリモデリングに関与するG protein-coupled receptor kinase 5(GRK5)が疾患関連因子として確認できた。それらにFOXO転写因子を追加した3因子について多角的な解析を進めた。DEPP については、ヒト軟骨細胞において飢餓状態、酸化ストレスなどでその発現が亢進することを確認し、CRISPR/Cas9システムを用いたノックアウトマウスの作成を完了した。表現型は、雄のみに特徴的な外観を認め、なんらかの性差に関与する機能が予想される。生後早期の個体より軟骨細胞を採取し、マイクロアレイによる機能解析を開始した。GRK5については、GRK5 ノックアウトマウスの軟骨細胞の遺伝子プロファイルをマイクロアレイによって解析した。野生型に比較し、著明な炎症性サイトカインやプロテアーゼの発現低下を認めた。GRK5インヒビターなどを用いて培養軟骨細胞での詳細な機能解析を行った。さらに、GRK5インヒビターは治療薬として国内特許出願を行った。FOXO転写因子については、主に関節軟骨形成に関わる機能解析を行った。FOXO転写因子は、加齢に伴う軟骨変性に重要な因子であることに加え、軟骨分化にも必須の因子であることを確認した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
同定した疾患関連遺伝子のin vitroでの機能解析とノックアウトマウスの作成を滞りなく遂行し、詳細な解析へと進めることができた。それぞれのノックアウトマウスは特徴的な表現型を認め、疾患関連因子のさらなる機能解析へとつなげることができた。また、同様の研究手法を用いて新規の疾患関連因子を同定・評価するシステムを構築できた。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成29年度までに同定した２因子についての機能解析を引き続き継続する。両因子ともにノックアウトマウスの作成が完了しており、軟骨細胞の解析・変形性関節症モデルの作成などにより滞りなく研究を推進する。同時に、他の疾患関連因子の同定とそれらのクロストークを明らかにし、多角的な課題の遂行を目指す。
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