| 研究実績の概要 |
ヒト食道癌細胞株14株におけるALDH1（癌幹細胞マーカー)を評価し、その中でも発現の高いTE-4、8よりセルソーターを用いて癌幹細胞を抽出し、培養可能な細胞株を樹立した。これらをsphere formation assayで濃縮した上で、ALDH1 mRNAの発現を評価したところ、ALDH1が起源の癌細胞株(TE-4, TE-8)より高発現していることを確認した。
次にこれらをマイクロアレイ法で遺伝子解析し、特にイオン輸送体に注目して、起源の細胞株と比較して癌幹細胞で高発現している分子を同定した。本研究の仮説では、Apoptotic volume decreaseに関連するイオン輸送体が変化していると予想しており、一部のクロライドチャネル(ANO7, CLCN5)は高発現していることが判明したが、実際には細胞内カルシウムイオン濃度に関与する分子（ATP2A1, ATP2A3, ORAI, S100蛋白)がより高発現していた。これらの内、ATP2A1と,その他薬剤の標的となり得るイオン輸送体ATP1B2, SLC12A2についてRT-PCR法で発現を確認したところ、同様に高発現していることが確認された。細胞内カルシウム濃度はアポトーシスに強く関与することから、癌幹細胞のアポトーシス回避にはカルシウム濃度調整に関連するイオン輸送体が関与し、これらを標的とした薬剤を用いて癌幹細胞のアポトーシス回避機構を破綻に導くことができるという仮説を新たなに立て、検証することとした。ATP2A1に特異的に作用する薬剤を用いて通常癌細胞と癌幹細胞における増殖抑制効果の検証を行った。その結果、癌幹細胞においてある程度IC50が低値であることが判明した。この結果から、細胞内カルシウム濃度調整を標的とした薬剤は癌幹細胞特異的治療法となる可能性があり、臨床応用を目指してさらなる検証が必要である。
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