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2018 年度 実績報告書

微生物電極界面電子移動の理解と制御に基づくin-vivo酵素反応速度測定法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 17J02602
研究機関東京大学

研究代表者

徳納 吉秀  東京大学, 工学系研究科, 特別研究員(DC2)

研究期間 (年度) 2017-04-26 – 2019-03-31
キーワード細胞外電子移動 / 酸化還元酵素 / 鉄還元細菌 / 光合成細菌 / ヘムタンパク質 / 微生物燃料電池 / 外膜シトクロム / フラビン
研究実績の概要

ある種の微生物は細胞外膜にシトクロムタンパク質(OM c-Cyts)を局在化させることで、細胞外の電極との電子のやり取り(細胞外電子移動(EET))を可能とする。本研究は、精密電気化学測定によりEET菌内酵素の反応電子数を計測し、反応速度を測定するプラットフォームとなる技術を確立することを目的としており、本年度は光合成細菌を用いた計測を行った。しかし、前年度に試みたモデルEET菌(シュワネラ)の電気化学測定と異なり、数か月の試行錯誤を経てなお光合成細菌に起因する電気シグナルの検出には至らなかった。考察の結果、その原因は光合成細菌の電気化学測定の技術的な難度だと考えられた。そこでオーストラリアへと渡航し、光合成細菌の測定に関する知見を有しているクイーンズランド大学のStefano Freguia准教授のもとで実験を行った。その結果、光合成細菌を利用した電気化学測定系の確立に成功し、代謝と酵素反応速度に対応した電気シグナルを取得することができた。本結果は、モデルEET菌であるシュワネラのみならず、EET能を有する多彩な微生物に対して本酵素反応速度測定手法が利用できることを強く示唆するものである。以上の成果に関し、現在論文を執筆している。
また、前年度の検討により、シュワネラ菌内のOM c-Cytsがヘムの空間配置を反映した極めて強い円偏光二色性シグナルを示すことが明らかになっている。本知見に基づきOM c-Cytsのシグナル強度を定量比較することで、外膜・細胞外固体との相互作用や電子の流れといった生体特異的な環境の変化によりOM c-Cytsの構造が柔軟に変化することが明らかになった。これらの内容はChemical Communications誌、Langmuir誌に原著論文として掲載され、いずれも雑誌カバーとして採択された。

現在までの達成度 (段落)

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2019 2018 その他

すべて 国際共同研究 (3件) 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (1件)

  • [国際共同研究] University of East Anglia(英国)

    • 国名
      英国
    • 外国機関名
      University of East Anglia
  • [国際共同研究] The China University of Geosciences(中国)

    • 国名
      中国
    • 外国機関名
      The China University of Geosciences
  • [国際共同研究] The University of Queensland(オーストラリア)

    • 国名
      オーストラリア
    • 外国機関名
      The University of Queensland
  • [雑誌論文] Whole-cell circular dichroism difference spectroscopy reveals an in vivo-specific deca-heme conformation in bacterial surface cytochromes2018

    • 著者名/発表者名
      Tokunou Yoshihide、Chinotaikul Punthira、Hattori Shingo、Clarke Thomas A.、Shi Liang、Hashimoto Kazuhito、Ishii Kazuyuki、Okamoto Akihiro
    • 雑誌名

      Chemical Communications

      巻: 54 ページ: 13933~13936

    • DOI

      10.1039/C8CC06309E

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Geometrical Changes in the Hemes of Bacterial Surface c-Type Cytochromes Reveal Flexibility in Their Binding Affinity with Minerals2018

    • 著者名/発表者名
      Tokunou Yoshihide、Okamoto Akihiro
    • 雑誌名

      Langmuir

      巻: 印刷中 ページ: 印刷中

    • DOI

      10.1021/acs.langmuir.8b02977

    • 査読あり
  • [学会発表] 微生物外膜タンパク質内多核ヘム電子移動鎖配向の差分円偏光二色性測定を用いた直接追跡2019

    • 著者名/発表者名
      徳納吉秀、岡本章玄
    • 学会等名
      第66回応用物理学会春季学術講演会

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公開日: 2019-12-27  

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