重症感染症に伴うARDSにおけるPGD2／CRTH2を介する病態メカニズムの解明

2017 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17J05376
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 鈴木 翔二 慶應義塾大学, 医学研究科, 特別研究員(DC2)
• 研究期間 (年度): 2017-04-26 – 2019-03-31
• キーワード: CRTH2

研究実績の概要

我々はすでにCRTH2特異的阻害薬の投与により、LPS誘導性エンドトキシンショックにおけるマウスの生存率が改善する結果を得ている。
その機序を解明するために各種実験を行い、検討した。
まず、LPS投与の2, 6, 12時間後に腹腔内洗浄液を採取し、ELISAでサイトカイン濃度の測定をおこなったところ、CRTH2特異的阻害薬投与群において、CXCL10, IFN-γ, TNF-αの濃度が低下していた。CRTH2特異的阻害薬投与による炎症性サイトカインの変化がLPS誘導性エンドトキシンショックでの生存率改善に寄与していることが示唆された。その中でも、特にIFN-γ－CXCL10が重要な役割を果たしている可能性があると考えられた。
次に、IFN-γの産生源を検討するために、腹腔内洗浄液をflow cytometryで解析したが、IFN-γを産生することが知られているCD4+ T cellやNK cellの割合に明らかな差は認められなかった。（ただし、CD4+ T cell, NK cellともにCRTH2特異的阻害薬の投与により減少する傾向であった）
細胞割合に差はなかったが、細胞の機能に差がある可能性がある。そのために、細胞機能を解析する目的で、腹腔内洗浄液からNK cellをMACSにて単離し、RT-PCRにて遺伝子の発現を評価した。その結果、CRTH2特異的阻害薬投与群では、対照群と比較し、LPS投与後のIFN-γのmRNA上昇が抑制されていた。同様の検討をCD4+ T cellでも行い、CRTH2特異的阻害薬の投与によりIFN-γのmRNA発現が変化するかを検討する予定としている。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

LPS誘導性エンドトキシンショックモデルにおいて、CRTH2特異的阻害薬が対象となる細胞集団が明らかになりつつあるが、肺障害における機序解明には至らなかった。また、in vitroの系が確立できていない点も進捗が遅れている理由である。

今後の研究の推進方策

まずは、細胞内染色にて、IFN-γの産生源を検討することを考えている。
気管支肺胞洗浄液中でも上記と同様の検討を行い、肺内でも同様の現象が生じているか、検討する。同様の検討をCRTH2ノックアウトマウスでも行う予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Aspergillus precipitating antibody in patients with Mycobacterium avium complex lung disease: A cross-sectional study (2018)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Asakura T, Namkoong H, Okamori S, Yagi K, Kamata H, Uwamino Y, Funatsu Y, Nakano Y, Nishimura T, Ishii M, Ebihara T, Betsuyaku T, Hasegawa N
  • 雑誌名: Respiratory Medicine 巻: in Press ページ: in Press
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Anti-inflammatory roles of mesenchymal stromal cells during acute Streptococcus pneumoniae pulmonary infection in mice (2018)
  • 著者名/発表者名: Asami T, Ishii M, Namkoong H, Yagi K, Tasaka S, Asakura T, Suzuki S, Kamo T, Okamori S, Kamata H, Zhang H, Hegab AE, Hasegawa N, Betsuyaku T
  • 雑誌名: Cytotherapy 巻: pii: S1465-3249(18)30009-4. ページ: in Press
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Mycobacterium triplex Pulmonary Disease with Acquired Macrolide Resistance in Immunocompetent Patients (2018)
  • 著者名/発表者名: Matsuda S, Suzuki S, Morimoto K, Aono A, Nishio K, Asakura T, Sasaki Y, Namkoong H, Nishimura T, Ogata H, Hasegawa N, Kurashima A, Ishii M, Tatsumi K, Mitarai S, Goto H
  • 雑誌名: Clin Microbiol Infect 巻: pii: S1198-743X(17)30713-9 ページ: in Press
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Clinical characteristics of pulmonary Mycobacterium lentiflavum disease in adult patients (2018)
  • 著者名/発表者名: Yagi K, Morimoto K, Ishii M, Namkoong H, Okamori S, Asakura T, Suzuki S, Asami T, Uwamino Y, Funatsu Y, Fujiwara H, Kamata H, Nishimura T, Betsuyaku T, Kurashima A, Hasegawa N
  • 雑誌名: Int J Infect Dis 巻: 67 ページ: 65-69
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Impact of chronic Pseudomonas aeruginosa infection on health-related quality of life in Mycobacterium avium complex lung disease (2017)
  • 著者名/発表者名: Kamata H, Asakura T, Suzuki S, Namkoong H, Yagi K, Funatsu Y, Okamori S, Uno S, Uwamino Y, Fujiwara H, Nishimura T, Ishii M, Betsuyaku T, Hasegawa N
  • 雑誌名: BMC Pulm Med 巻: 17 ページ: 198
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Impact of cavity and infiltration on pulmonary function and health-related quality of life in pulmonary Mycobacterium avium complex disease: A 3-dimensional computed tomographic analysis (2017)
  • 著者名/発表者名: Asakura T, Yamada Y, Namkoong H, Suzuki S, Niijima Y, Kamata H, Funatsu Y, Yagi K, Okamori S, Sugiura H, Ishii M, Jinzaki M, Betsuyaku T, Hasegawa N
  • 雑誌名: Respir Med 巻: 126 ページ: 9-16
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Long-term Outcome of Pulmonary Resection for Nontuberculous Mycobacterial Pulmonary Disease (2017)
  • 著者名/発表者名: Asakura T, Hayakawa N, Hasegawa N, Namkoong H, Takeuchi K, Suzuki S, Ishii M, Betsuyaku T, Abe Y, Ouchi M
  • 雑誌名: Clin Infect Dis 巻: 65 ページ: 244-251
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] ADAM17が肺気腫発症に与える影響の検討 (2017)
  • 著者名/発表者名: 鈴木 翔二、石井 誠、朝倉 崇徳、南宮 湖、八木 一馬、加茂 徹郎、岡森 慧、鎌田 浩史、堀内 圭輔、長谷川 直樹、別役 智子
  • 学会等名: 第57回日本呼吸器学会学術講演会
• [学会発表] Protective Role of a Disintegrin and Metalloprotease 17 (ADAM17) in Elastase-Induced Emphysema in Mice (2017)
  • 著者名/発表者名: Suzuki S, Ishii M, Asakura T, Namkoong H, Okamori S, Yagi K, Kamata H, Kagawa S, Horiuchi K, Horiuchi K, Hasegawa N, Betsuyaku T
  • 学会等名: The Annual International Conference of American Thoracic Society
  • 国際学会