機能性ペプチドを利用した受容体特異的分子プローブの開発

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K01954
• 研究機関: 東京薬科大学
• 研究代表者: 片桐 文彦 東京薬科大学, 薬学部, 講師 (60420642)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: ペプチド / 受容体 / 遊走 / ケミカルバイオロジー

研究実績の概要

受容体に特異的に結合する分子プローブの開発は、受容体の機能解析に留まらず、疾患の原因解明や創薬に直結する。インテグリンやシンデカンなどサブタイプが多く存在する受容体に特異的に結合する分子プローブの開発には、低分子化合物ライブラリーを用いたスクリーニングが効率的であると考えられる。本申請課題では、申請者らが所有する基底膜タンパク質「ラミニン」のアミノ酸配列を網羅する合成ペプチドライブラリー（ラミニンペプチドライブラリー）のスクリーニングによって見出された機能性ペプチドを構造活性相関に附し、ケミカルバイオロジーの手法なども取り入れて、受容体特異的な分子プローブの開発を目的とする。
申請者らは現在までに、全11種類のラミニンサブユニット全てのアミノ酸配列を網羅する合成ペプチドライブラリーの作成を完了している。また、現在までに、複数のインテグリン結合、2種のジストログリカン結合ペプチド、多数のシンデカン結合ペプチドを見出している。
今年度は、ラミニンペプチドライブラリーのHDFを用いた細胞遊走スクリーニングを行った。ラミニンγ1、γ2、γ3鎖配列由来ペプチドについて完了した。申請者らが見出した細胞接着ペプチドの中で、明確な生物活性を示すが、受容体が同定できなかったペプチドC16（KAFDITYVRLKF：マウスラミニンγ1鎖139-150）について、光親和性標識を導入し、cell lysateを用いたpull-down assayによって受容体の同定を試みており、プロテオーム解析の手法を用いてタンパク質検索を行った。現在、論文を作成中である。

研究成果

• [雑誌論文] Sensitive and selective quantification of mid-regional proadrenomedullin in human plasma using ultra-performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry (2020)
  • 著者名/発表者名: Iwao Motoshi、Suzuki Yosuke、Tanaka Ryota、Koyama Teruhide、Ozaki Etsuko、Nakata Takeshi、Aoki Kohei、Fukuda Akihiro、Sato Yuhki、Kuriyama Nagato、Fukunaga Naoya、Sato Fuminori、Katagiri Fumihiko、Ohno Keiko、Shibata Hirotaka、Mimata Hiromitsu、Itoh Hiroki
  • 雑誌名: Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 巻: 183 ページ: 113168～113168
  • DOI: 10.1016/j.jpba.2020.113168
• [雑誌論文] Therapeutic and Adverse Effects of Thrombomodulin Alfa to Treat Sepsis-Induced Disseminated Intravascular Coagulation (2019)
  • 著者名/発表者名: Imaura Masaharu、Tsumori Miki、Nagase Satoshi、Omura Kazuya、Takahashi Hiroyuki、Hatoyama-Tanaka Saori、Katagiri Fumihiko、Takayanagi Risa、Kanno Hiroshi、Yamada Yasuhiko
  • 雑誌名: SHOCK 巻: - ページ: 1～1
  • DOI: 10.1097/SHK.0000000000001477
• [雑誌論文] Identification of active sequences in human laminin α5 G domain (2019)
  • 著者名/発表者名: Kumai Jun、Yamada Yuji、Hamada Keisuke、Katagiri Fumihiko、Hozumi Kentaro、Kikkawa Yamato、Nomizu Motoyoshi
  • 雑誌名: Journal of Peptide Science 巻: 25 ページ: -
  • DOI: 10.1002/psc.3218
• [雑誌論文] Characterization of dystroglycan binding in adhesion of human induced pluripotent stem cells to laminin-511 E8 fragment (2019)
  • 著者名/発表者名: Sugawara Yumika、Hamada Keisuke、Yamada Yuji、Kumai Jun、Kanagawa Motoi、Kobayashi Kazuhiro、Toda Tatsushi、Negishi Yoichi、Katagiri Fumihiko、Hozumi Kentaro、Nomizu Motoyoshi、Kikkawa Yamato
  • 雑誌名: Scientific Reports 巻: 9 ページ: -
  • DOI: 10.1038/s41598-019-49669-x
• [雑誌論文] Prediction of clinical effects of infliximab administered for inflammatory bowel disease based on pharmacokinetic and pharmacodynamic modeling (2019)
  • 著者名/発表者名: Kimura Koji、Yoshida Atsushi、Katagiri Fumihiko、Takayanagi Risa、Yamada Yasuhiko
  • 雑誌名: Biopharmaceutics & Drug Disposition 巻: 40 ページ: 250～261
  • DOI: 10.1002/bdd.2198
• [学会発表] The evaluation of prokinetic effect of low-dose sulpiride administration from the viewpoint of plasma brain-gut peptide levels in healthy human (2019)
  • 著者名/発表者名: F. Katagiri, K. Kimura, R. Takayanagi, Y. Yamada
  • 学会等名: The 14th Congress of the European Association for Clinical Pharmacology and Therapeutics
  • 国際学会
• [学会発表] Identification of biologically active site in mouse laminin α3B chain N terminal region (2019)
  • 著者名/発表者名: F. Katagiri, M. Hashidume, N. Midorikawa, S. Hiraoka, K. Kimura, R. Takayanagi, K. Hozumi, Y. Kikkawa, M. Nomizu, Y. Yamada
  • 学会等名: ASCB/EMBO 2019 meeting
  • 国際学会
• [学会発表] Characterization of dystroglycan binding in adhesion of human induced pluripotent stem cells to laminin-511 E8 fragment (2019)
  • 著者名/発表者名: Y. Kikkawa, Y. Sugawara, K. Hamada, Y. Yamada, J. Kumai, M. Kanagawa, K. Kobayashi, T. Toda, Y. Negishi, F. Katagiri, K. Hozumi, M. Nomizu
  • 学会等名: ASCB/EMBO 2019 meeting
  • 国際学会