PKCetaを分子標的とした新規肺癌治療戦略

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K07226
• 研究機関: 昭和大学
• 研究代表者: 大場 基 昭和大学, 大学共同利用機関等の部局等, 講師 (70297018)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: PKC / 肺がん / 分子標的治療薬

研究実績の概要

以下の３点について重点的に研究を行い、多くの成果が得られた。
１）PKCηノックダウンによる増殖・細胞運動抑制メカニズムの解明と下流因子の同定
PKCηノックダウンによる非小細胞肺がん株の顕著なアポトーシス誘導と細胞運動の抑制は、増殖因子受容体の分解促進や細胞接着因子の局在変化・異常が主たる原因である。その分子メカニズムとして、PKCηノックダウン細胞内では膜トラフィッキング制御因子RAB11が恒常的に活性化していること、またゴルジ体への局在異常が生じていることを明らかとした。更に、それらの異常は、ゴルジ体におけるPKCηによるRAB11スレオニン残基のリン酸化が阻害されるためであることをin vitro及びin vivoの実験系から証明した。現在、これらの成果に関する特許出願及び論文投稿を進めている。
２）PKCηに対する新規低分子阻害剤の探索　　　本研究課題で用いたPKCηプロモーターDNAとルシフェラーゼ遺伝子によるレポーターシステムと、同スクリーニング系を使用した既知低分子物質化合物の探索から、indirubin-3'-monoxime等、３種のPKCηmRNA発現阻害物質を見いだした。それらの成果を、特許：特願2019-181792、発明の名称：ベクター、形質転換体、PKCη発現調節物質のスクリーニング方法並びにPKCη発現阻害剤として出願した。
３)核酸医薬品の探索　　ヒトPKCηの発現をより高効率・安定的に抑制する新規siRNA配列の検索・同定を行った。これらの成果も特許として出願準備中である。

研究成果

• [雑誌論文] RAS and EGFR Amplifications Mediate Resistance to Rociletinib and Osimertinib in Acquired Afatinib-Resistant NSCLC Harboring Exon 19 Deletion/T790M in EGFR. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakatani K, Yamaoka T, Ohba M, Fujita KI, Arata S, Kusumoto S, Taki-Takemoto I, Kamei D, Iwai S, Tsurutani J, Ohmori T.
  • 雑誌名: Mol Cancer Ther. 巻: 18 ページ: 112-126
  • DOI: 10.1158/1535-7163.MCT-18-059
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blockade of EGFR Activation Promotes TNF-Induced Lung Epithelial Cell Apoptosis and Pulmonary Injury. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yamaoka T, Arata S, Homma M, Homma T, Kusumoto S, Ando K, Manabe R, Kishino Y, Ohba M, Tsurutani J, Takimoto M, Ohmori T, Sagara H.
  • 雑誌名: Int J Mol Sci. 巻: 20(16) ページ: E4021
  • DOI: 10.3390/ijms20164021.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Establishment and Characterization of Three Afatinib-resistant Lung Adenocarcinoma PC-9 Cell Lines Developed with Increasing Doses of Afatinib. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yamaoka T, Ohba M, Matsunaga Y, Tsurutani J, Ohmori T.
  • 雑誌名: J Vis Exp. 巻: 26;(148). ページ: -
  • DOI: 10.3791/59473.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] New lung cancer treatment strategy with molecular target of PKCeta (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohba, Motoi
  • 雑誌名: Impact 巻: 2019(8) ページ: 56-58
  • DOI: https://doi.org/10.21820/23987073.2019.8.56
  • オープンアクセス
• [学会発表] Regulation of accelerated membrane trafficking by PKC eta via the phosphorylation of Rab11 in lung cancer cells. 和文演題名:PKCηによる肺がん特異的な増殖因子受容体膜輸送の亢進機構 (2019)
  • 著者名/発表者名: 大場基、山岡利光、石川文博、戸谷衣都子、村上善則
  • 学会等名: 第７８回日本癌学会学術総会
• [学会発表] 術前化学療法有り、無し乳がん患者における予後因子としてのBRCAness検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 松永有紀、大場基、中村清吾、鶴谷純司
  • 学会等名: 第７８回日本癌学会学術総会
• [産業財産権] ベクター、形質転換体、PKCη発現調節物質のスクリーニング 方法並びにPKCη発現阻害剤 (2019)
  • 発明者名: 大場 基
  • 権利者名: 昭和大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2019-181792