| 研究課題/領域番号 |
17K07946
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
藪 健史 日本大学, 生物資源科学部, 研究員 (00551756)
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| 研究分担者 |
山下 倫明 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 水産大学校, 教授 (80344323)
今村 伸太朗 国立研究開発法人水産研究・教育機構, 中央水産研究所, 主任研究員 (80510007)
司馬 肇 (張培淦) 日本大学, 生物資源科学部, 教授 (90256834)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 水産化学 / セラミド / 核 / アポトーシス / スフィンゴミエリナーゼ / ストレス |
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| 研究実績の概要 |
セラミドは，熱や紫外線，化学物質等のストレス，インターフェロンγ，Fasリガンドなどの炎症性サイトカインの刺激に応答して生成され，神経系，血管系，免疫系の形成および性の分化におけるアポトーシスに関与する.申請者らは，アポトーシス誘導時におけるスフィンゴミエリナーゼ群によるセラミド生成機構を明らかにしてきたが，セラミドが核崩壊や遺伝子転写調節を誘発する機序は依然不明である.そこで，本研究では，スフィンゴミエリナーゼを活性化し，膜脂質セラミドを生成し，核崩壊を誘導するスフィンゴミエリナーゼを特定する.この酵素が，核膜を構成するスフィンゴミエリンを加水分解することによって，膜の剛性が微弱となり核膜の崩壊を誘導し，細胞運命を決定することを，バイオアッセイによって解析する.
nSMase1の活性化と直鎖ユビキチン化との関係を調べるため，TNF-αおよびIL-１βの炎症性サイトカインの刺激応答によるnSMase1の直鎖ユビキチン化をウエスタンブロット法により解析した。TNF-αリガンドで刺激後，nSMase1へのユビキチン化が減少することが観察された。一方，IL-１βにおいても同様の結果であった。
以上のことから，アポトーシス誘導における核膜の崩壊に至るシグナル伝達機構は，炎症性サイトカインに刺激によってユビキチン化nSMaseからユビキチンが遊離し，JNKキナーゼのリン酸化よりnSMaseを活性化し，スフィンゴミエリンの加水分解により膜脂質セラミドを生成し，核膜の崩壊を誘発する機構が推定された。
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