研究課題
H29年度より解析を進めてきた骨格筋Pax7遺伝子の脂肪前駆細胞内における機能についてさらに解析を進め論文および学会にて発表を行った。本結果によりPax7が筋肉および脂肪細胞の分化転換能力を持つ可能性が明らかとなった。Pax7は骨格筋細胞内では転写を活性化させる転写因子として報告されているが、脂肪前駆細胞においては転写を抑制するリプレッサーとして機能してる。現在はクロマチン免疫沈降法を用いてPax7のターゲット遺伝子を同定するべく解析を進めている。Pax7単体もしくは核内に存在する他のタンパク質と複合体を形成しDNAに結合している転写因子であると仮定している。。脂肪分化抑制機構に加えて、脂肪細胞分化が阻害された場合、Pax7導入細胞が筋肉分化に誘導しているか否かを明らかにするために、培養条件やco-factorsの必要性も考慮に入れ、筋肉細胞誘導を試みた。H30年度における条件検討では筋管形成の確認までは至っていないが継続して解析を進めている。
2: おおむね順調に進展している
研究課題の大きな柱である、脂肪細胞分化の抑制機構については順調に進んでおり最終年度（H31年度）でターゲット遺伝子を同定すれば研究計画を達成できる。筋系細胞への分化誘導機構はPax7発現のみでは不十分であることが判明し、培養条件Pax7のco-factorsを同定することで解析を進めている。
脂肪細胞分化の抑制機構はターゲット候補としている遺伝子群がPax7により直接転写抑制を受けているのかをPCR解析にて明らかにする。筋系細胞については候補としてクローニングし発現ベクターを作成したMyf5等をトランスフェクションで導入することで、分化能力に与える効果を筋管形成率や分化後期マーカーの発現活性化等の指標を用いて解析を行う方針である。
計画時には外部委託を行なって解析を進める予定であったが、学内の共同利用施設にある機器を用いて解析を行なった。今年度は必要となるタンパク質解析試薬が増やしこれまでの成果をさらに展開していく予定である。そのために実験補助者の短期雇用を行い最終年度終了までに実験結果を得る予定である。
すべて 2019 2018 その他
すべて 国際共同研究 (1件) 雑誌論文 (7件) (うち査読あり 6件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (10件) (うち国際学会 1件) 備考 (1件)
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