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2019 年度 実績報告書

全ゲノムシークエンス解析を応用した鹿由来志賀毒素産生大腸菌のリスク評価

研究課題

研究課題/領域番号 17K08087
研究機関日本大学

研究代表者

壁谷 英則  日本大学, 生物資源科学部, 教授 (10318389)

研究分担者 横山 栄二  千葉県衛生研究所, 細菌研究室, 室長 (40370895)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
キーワード志賀毒素産生大腸菌 / O157 / 鹿 / 猪 / 全ゲノム解析 / 病原遺伝子 / ジビエ / PFGE
研究実績の概要

2013年9月から2020年3月にかけて、23府県の鹿639頭(うち令和元年度:13府県168頭)、19府県の猪487頭(うち令和元年度:12府県104頭)の直腸便を供試した。O157の分離は、糞便0.5g量を4.5mLのノボビオシン加mEC培地に接種して42℃で18時間増菌培養後、クロモアガーO157培地、CT-SMAC培地に塗抹し37℃、24時間培養した。各培地上のO157を疑うコロニーを回収し、PCRによりstx遺伝子が陽性かつrfbE O157遺伝子を保有し、O157スライドラテックス凝集反応で陽性となった株をO157と同定した。O157分離株、および一部のSTEC株については次世代シーケンサーを用いた全ゲノム解析を行い、VirulenceFinder 2.0により病原関連遺伝子と薬剤耐性遺伝子を網羅的に解析した。
本研究では、鹿の11.0%(70/639頭)(令和元年度:4.2%:7/168)、猪の3.3%(16/487頭)(令和元年度:1.0%:1/104)からSTECが分離された。また、鹿の1.1%(7/639頭)(令和元年度:0%:0/168)、猪の0.6%(3/487頭)(令和元年度:0%:0/104)からO157が分離された。
これまでに我々が分離した全てのO157分離株(鹿5株、猪3株)、および鹿由来O5,O26,O83,O104各STECの全ゲノム解析では、O157で5,294,527bp~5,49850bp、のnonO157 STECでは3,769,174~4,961,358bpの塩基配列が決定され、O157では20~22個、O5,O26では21個、O83で5個O104で13個の病原関連遺伝子が検出された。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2020 2019

すべて 学会発表 (4件) (うち招待講演 2件)

  • [学会発表] 野生動物の有効利用と注意すべき感染症-細菌性感染症-2020

    • 著者名/発表者名
      壁谷英則
    • 学会等名
      令和元年度 日本獣医師会獣医学術学会年次大会
    • 招待講演
  • [学会発表] わが国の鹿・猪におけるCampylobacterおよびArcobacterの保菌状況と分離株の病原性2020

    • 著者名/発表者名
      森田聡志、宮川明日香、佐藤真伍、丸山総一、奈良崎孝一郎、奈良崎和孝、壁谷英則
    • 学会等名
      令和元年度 日本獣医師会獣医学術学会年次大会
  • [学会発表] わが国の鹿・猪におけるCampylobacterおよびArcobacterの保菌状況と分離株の病原性解析2019

    • 著者名/発表者名
      森田聡志、宮川明日香、佐藤真伍、丸山総一、奈良崎孝一郎、奈良崎和孝、壁谷英則
    • 学会等名
      第162回日本獣医学会学術集会
  • [学会発表] 野生動物が原因となる細菌性人獣共通感染症2019

    • 著者名/発表者名
      壁谷英則
    • 学会等名
      日本防菌防黴学会 第46回年次大会
    • 招待講演

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公開日: 2021-01-27  

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