レストンエボラウイルス感染実態の解明を目指した新たな基盤技術の創出

2017 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K08091
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 福士 秀悦 国立感染症研究所, ウイルス第一部, 主任研究官 (80373398)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: レストンエボラウイルス / モノクローナル抗体

研究実績の概要

本研究は、カニクイザルにおけるレストンエボラウイルス(REBOV)感染実態を解明するための新たな基盤技術の確立を目指す。
先ず、REBOVに対するモノクローナル抗体を作製することを目的とする。REBOVのGPタンパク質はウイルス中和抗体の標的部位であり、この部位に対する抗体はウイルス特異性が高い。そこで、REBOVのリコンビナントGPを哺乳細胞で発現させ、精製した。このリコンビナントGPをモノクローナル抗体を得るための免疫抗原として用いる予定である。
次に、REBOVの遺伝子系統解析から、2015年にフィリピンのサル管理施設で流行したREBOVは2008年にフィリピンのブタ間で流行したREBOVに近縁であることを明らかにした。また、これまで明らかになったウイルス遺伝子情報を集積し、高度に保存された領域にプライマー、プローブを設定し、REBOV特異的リアルタイムPCR法を構築した。ポジティブコントロールとして、レストンEBOV遺伝子をクローニングしたプラスミド(P.C.)を作製した。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

REBOVに対するモノクローナル抗体を作製するための抗原調製および、REBOV特異的リアルタイムPCRの構築が概ね順調に進展した。

今後の研究の推進方策

REBOVに対するモノクローナル抗体の作製とその性状解析を進める。レストンEBOVのみならず、それ以外（ザイール、スーダン、ブンディブギョ、アイボリーコースト型）のGPを哺乳培養細胞で発現させ、調製したMAbがレストンEBOV-GPのみに特異的かどうか、蛍光抗体法等により確認する。また、種々の合成RNAおよびREBOV以外のRNAを用いてREBOVリアルタイムPCRの特異性、感度を検討する。

次年度使用額が生じた理由

（理由）年度末未納品等にかかる支払いが平成30年4月1日以降となったため、当該支出分については次年度の実支出額に計上予定。平成29年度分についてはほぼ使用済みである。
（使用計画）上記のとおり。

研究成果

• [国際共同研究] Research Institute for Tropical Medicine/INA Research Philippines(Philippines)
  • 国名: フィリピン
  • 外国機関名: Research Institute for Tropical Medicine/INA Research Philippines
• [国際共同研究] Australian Animal Health Laboratory(Australia)
  • 国名: オーストラリア
  • 外国機関名: Australian Animal Health Laboratory
• [雑誌論文] Re-emergence of Reston Ebola Virus in Cynomolgus Monkeys in the Philippines, 2015 (2018)
  • 著者名/発表者名: Catalino Demetria, Ina Smith, Titus Tan, Daniel Villarico, Edson Michael Simon, Rex Centeno, Mary Tachedjian, Satoshi Taniguchi, Masayuki Shimojima, Noel Lee J. Miranda, Mary Elizabeth Miranda, Melissa Marie R. Rondina , Rowena Capistrano, Amado Tandoc III, Glenn Marsh, Debbie Eagles, Ramses Cruz and Shuetsu Fukushi
  • 雑誌名: Emerging Infectious Diseases 巻: 印刷中 ページ: 印刷中
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著