| 研究課題/領域番号 |
17K08302
|
|---|
| 研究機関 | 旭川医科大学 |
|---|
研究代表者 |
笹島 仁 旭川医科大学, 医学部, 講師 (00374562)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2022-03-31
|
| キーワード | ドパミン / ミトコンドリア / フェロトーシス / パーキンソン病 / オートファジー / 活性酸素 / 神経保護 / 神経変性 |
|---|
| 研究実績の概要 |
従来研究から孤発性パーキンソン病をはじめとする脳内ドパミン神経変性には、ミトコンドリア異常やドパミン代謝が関与することが示唆されているが、詳細な細胞内分子メカニズムには不明な点が多く残されている。ミトコンドリア品質管理にかかわる分子の異常や、ミトコンドリア呼吸機能の異常は、モデル動物においてもドパミン神経変性を加速することが知られている。一方、ドパミンはその正常な代謝過程においても活性酸素や神経毒性分子を生ずることから、ドパミン神経変性を加速する因子と考えられている。しかし、ミトコンドリア機能とドパミン代謝との、神経変性に係る接点はいまだ不明である。
これまでの本研究の遂行により、ドパミン神経様分化型PC12細胞において、ミトコンドリア呼吸鎖複合体Iの阻害剤であるロテノンがもたらす神経細胞死には、活性酸素を生ずるドパミン分解酵素が必須であることをゲノム編集技術により明らかにした。また、ドパミン同様にカテコール骨格を有するハーブ由来ポリフェノールに、強力なドパミン変性阻止効果があることを見出した。ミトコンドリア呼吸鎖阻害がもたらすドパミン神経変性は、オートファジー阻害剤や鉄キレート剤で抑制されたことから、この過程に細胞内鉄イオン、オートファジーの関与が示唆される。他方、神経変性メカニズムの一つとして細胞内鉄イオンプール特異的なオートファジーであるフェリチノファジーの関与が報告されており、ドパミン神経変性モデルでのフェリチノファジーの誘導性の有無を検討している。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当該年度は、従来の急性ドパミン神経変性を誘導するロテノン処理の他、AAVを介したヒト病変型αシヌクレインの導入により、亜急性から慢性のパミン神経変性におけるフェロトーシス誘導について検討している。
|
| 今後の研究の推進方策 |
ドパミン神経変性モデルにおけるフェリチノファジー誘導の解析のため、鉄イオンプールをオートファジーへ導くカーゴタンパク質NCOA4に蛍光標識を施し、ロテノン負荷の有無、ドパミン分解代謝酵素の有無における神経変性過程を可視化することにより評価する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
申請者所属の大学共用設備の維持管理業務において、コロナ対応が追加業務として生じ、一部研究を次年度に先送りせざるを得なくなった。
生じた次年度使用額は、当該年度において使用期限を考慮し購入を先送りした蛍光細胞染色試薬すなわち消耗品購入費に充当する。
|
