研究課題
マウス胚性腫瘍（EC）細胞である P19細胞は，レチノイン酸（RA）により分化誘導され，神経細胞およびアストロサイトに分化することが知られている。P19細胞にCaspr4-pCDNA4を一過性に導入し，RA存在下において、Caspr4導入細胞およびコントロール細胞をMTT（3-（4, 5-ジメチル-チアゾール-2-イル）-2, 5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド）アッセイを実施した結果、コントロール細胞と比較して、Caspr4導入細胞の増殖能が減少した。次に、P19細胞株にCaspr4-pCDNA4をRA存在下において一過性に導入し、Caspr4がRA誘導による分化過程にどのような影響を及ぼすかについて定量的PCR法及びウェスタンブロット法を用いて検討した。P19細胞のRA処理神経分化誘導系において、sphere様の細胞塊を形成させたところ、コントロール細胞と比較して、Caspr4導入細胞において幹細胞マーカーの一つであるOct4 mRNAが減少した。同じく、Oct4タンパク質量も減少した。さらに、幹細胞におけるOct4の発現調節を担うTR2タンパク質（orphan nuclear receptor）の関与を検討したが、コントロール細胞と比較して、Caspr4導入細胞においてTR2の発現量に変化はなかった。このことから、本研究では、Caspr4のP19細胞における発現により、Oct4の発現が減少することで、細胞増殖能を低下させることが、Caspr4の神経分化への関与を示唆するメカニズムの一旦を明らかにした。今後、Caspr4を調節する因子を詳細に検討することで、Caspr4の自閉症への関与ならびに介在性ニューロンの分化機構を明らかにしていく。
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すべて 雑誌論文 (4件) (うち国際共著 4件、 査読あり 4件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (5件)
Anticaner Research
巻: 39(8) ページ: 4129-4136
Biol Pharm Bull.
巻: 42(11) ページ: 1953-1956
巻: 42(5) ページ: 833-836
Pediatr Int.
巻: 61(6) ページ: 558-565
