|
本研究では、遺伝子治療に利用可能な治療用タンパク質拡散システムの構築を行う。遺伝子治療の最も大きなハードルは、一部の細胞にしか遺伝子が導入されず、発現した治療用タンパク質の効果が限定的なことである。そこで、導入した遺伝子が産生する治療用タンパク質を、周辺細胞へも拡散させることで、治療効果の増強が可能なシステムを開発することを目的とする。
これまでに、研究代表者が開発した治療用タンパク質の拡散が可能なキャリアタンパク質を用いたがん遺伝子治療は、治療効果の増強を示すだけでなく、繰り返し投与においても安全性が高く、生体適合性の良いキャリアであることを明らかとした。
そこで令和元年度においては、キャリアタンパク質に対する抗体保持マウスを用いたがん遺伝子治療実験を行い、抗腫瘍効果の検討と共に、さらなる安全性評価を行った。また、キャリアタンパク質をベースとし、任意の細胞表面分子をターゲットとする改良型キャリアタンパク質を創生するため、ファージディスプレイライブラリシステムを用いたスクリーニング系の確立を試みた。
その結果、抗キャリアタンパク質抗体を保持したマウスによる安全性評価において、高抗体価においても、腫瘍増殖抑制効果に影響はなく、体重減少や安全性マーカーについてもコントロールマウスと比べ有意な差はなかった。in vitroの検討においても抗キャリアタンパク質抗体による拡散機能の低下は認められず、開発したキャリアタンパク質が抗キャリア抗体に対する回避機構を持つことが示唆された。
一方、ファージディスプレイライブラリシステムの構築において、ラムダファージ上にキャリアタンパク質を提示し、標的分子への結合部位にランダムなアミノ酸配列を提示することが可能であった。今後ライブラリーの数を増やし、スクリーニング系の構築につなげていきたい。
|
