| 研究課題/領域番号 |
17K08574
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
吉田 匡秀 自治医科大学, 医学部, 助教 (30533955)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | プロラクチン放出ペプチド / ストレス / レジリエンス / 心的外傷後ストレス障害 |
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| 研究実績の概要 |
ストレスを負荷された状態から、正常な状態に戻ろうとする復元力・回復力(レジリエンス)が不充分だとうつ病や心的外傷後ストレス障害といったストレス関連精神神経障害を発症するとされている。臨床的にはこの妥当性は認知されているが、その分子基盤は判っていない。申請者はレジリエンスを担う候補因子としてプロラクチン放出ペプチド(PrRP)を見出した。
PrRP は延髄孤束核、延髄腹外側部、視床下部背内側核の3 カ所に限局して発現する神経ペプチドである。申請者はこれまで、①社会的ストレス負荷により上記３カ所のPrRP 産生ニューロン全てが活性化されること、②PrRP 遺伝子欠損マウスに慢性の社会的ストレスを負荷すると、うつ様行動の一つである同種マウスに対する社会的探索意欲の減弱が起こること(以上、未発表データ)、③PrRP 遺伝子欠損マウスは条件恐怖学習における恐怖記憶が増強すること(Yoshida らEndocrinol.2014)、④PrRP を視床下部背内側核に局所投与すると不安行動が減弱すること(未発表データ)を見出した。これらの結果はPrRP がストレス負荷状態からの回復を促進するレジリエンス亢進因子であることを示唆している。本研究ではPrRPにはレジリエンス作用があるという仮説を検証する。
PrRP産生ニューロンを時間・空間的に選択破壊できる動物、PrRP受容体遺伝子欠損動物、PrRP受容体発現細胞レポーター動物、時間・空間的にPrRP受容体遺伝子を欠損できる動物の開発を行った。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
①プロラクチン放出ペプチド(PrRP)産生ニューロンを時間・空間的に選択破壊する実験系の開発を行った。すなわち、独自で開発したPrRP産生ニューロン特異的にヒトIL-2受容体αサブユニットを発現するBACトランスジェニック動物に、ヒトIL-2受容体αサブユニットに対するイムノトキシンを脳内局所投与する。これによりPrRP産生ニューロンを局所的に破壊する。イムノトキシン投与によるPrRP産生ニューロンの破壊の効果が確認できた。
②PrRP受容体遺伝子欠損動物をCRISPR/Cas9システムを用いて独自に作製している。
③PrRP受容体発現細胞レポーター動物を独自に作製している。すなわち、CRISPR/Cas9システムを用いて内在性PrRP受容体遺伝子制御下で蛍光タンパク質Venus遺伝子が発現する動物を開発している。
④時間・空間的にPrRP受容体遺伝子を欠損できる動物をCRISPR/Cas9システムを用いて独自に作製している。
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| 今後の研究の推進方策 |
プロラクチン放出ペプチド(PrRP)遺伝子欠損動物、および独自に開発しているPrRP産生ニューロンを時間・空間的に選択破壊できる動物、PrRP受容体遺伝子欠損動物、PrRP受容体発現細胞レポーター動物、時間・空間的にPrRP受容体遺伝子を欠損できる動物とウイルスベクターを用いて、① PrRPのレジリエンス作用を検証する実験、② 慢性ストレスによるPrRP遺伝子の発現変化またはPrRP量の変化を検証する実験、③ レジリエンス作用を担うPrRP産生ニューロン/PrRP受容体発現ニューロンを同定する実験を進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度の研究の結果からプロラクチン放出ペプチドのレジリエンス作用のメカニズムを明らかにできる可能性のある新たな結果が得られてきているため、実験計画の順序を変更した。本年度に行う予定であった実験は、引き続き次年度に行う。
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