研究課題
CL-P1過剰発現ヒト血管内皮細胞で証明されたCL-P1を介した補体活性化を、CL-P1過剰発現細胞でなく、炎症性サイトカイン（IL-1, IL-6, IL-8, TNFα）により、炎症状態を誘導することにより、CL-P1の発現動態および補体活性化を検討した。その対照として、CL-P1欠損ヒト血管内皮細胞をゲノム編集技術などにより作成し、比較を行う予定であったが、すでに検討の経験があるsiRNAを用いて行うことにした。この取り組みにより炎症性疾患における補体活性化のメカニズムの検討を行った。検討の結果、CL-P1の発現の亢進は見られなかったが、炎症性サイトカインの種類により差はあるものの細胞表面における補体因子C3の沈着を確認することが出来た。一方、CL-P1の発現をsiRNAにより抑制させたヒト血管内皮細胞ではC3の沈着が低く抑えられることからCL-P1依存的に補体活性化が進んでいることがわかった。実際にMAC形成まで補体活性化が進んでいるか抗sC5b-9抗体で検出を行ったところ、若干であるがMAC形成も確認できた。しかしながら、細胞が傷害されるほどではく、電子顕微鏡を用いてのMAC形成の確認には至らなかった。動物実験によるin vivoでの検討のために進めてきたモデルマウスの作製に関しては、ゲノム編集により作成する準備が整ったので、今後取り組んでいきたいと考えている。想定していた仮説とは異なった結果となったため、研究計画を大幅に変更せざるを得ず、マウスを用いたCL-P1を介した補体活性化メカニズムの解明には至らなかったが、現象としてCL-P1依存的な補体活性化が確認出来たことから、今後の取り組みにてin vivoでの機序の解明が出来ると考え、今後も研究を継続していきたいと考えている。
すべて 2021
すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (4件) (うち招待講演 1件)
Frontiers in Immunology
巻: 12 ページ: 695037～695037
10.3389/fimmu.2021.695037
Medicine
巻: 100 ページ: e25265～e25265
10.1097/MD.0000000000025265
