| 研究課題/領域番号 |
17K08675
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
八木下 尚子 聖マリアンナ医科大学, 医学研究科, 講師 (40367389)
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| 研究分担者 |
中島 利博 東京医科大学, 医学部, 教授 (90260752)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 関節リウマチ / 滑膜細胞 / シノビオリン / 小胞体関連分解 / E3ユビキチン化酵素 / がん細胞 / エネルギー代謝 |
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| 研究実績の概要 |
関節リウマチ（RA）滑膜細胞に過剰発現するシノビオリンは、小胞体関連タンパク質分解で機能するユビキチン化酵素である。我々はこれまでに、シノビオリンが小胞体ストレス誘導性アポトーシスを抑制することで滑膜細胞の過増殖を引き起こし、RAの発症因子となることを示した。さらにシノビオリンはp53や、ミトコンドリアの生成と機能制御に重要なPGC-1β、Nrf2を基質とすることを明らかとし、2つのアポトーシス経路とミトコンドリアを介したエネルギー代謝を制御することを示した。以上のシノビオリンの機能は、がん細胞を特徴づける性質と相似しているため、本研究ではがん細胞と滑膜細胞の共通点からみたシノビオリンのトコンドリア制御を介した滑膜細胞の生理機能とその生物学的意義の解明を試みることを目的とした。
具体的には、①RA滑膜細胞を用いて、RAではシノビオリンを介したミトコンドリア制御がどのようになっているのかをsiRNA、各種変異体シノビオリン発現プラスミド、シノビオリン阻害剤を用いて検討し、②滑膜細胞特異的シノビオリン遺伝子欠損（KO）マウスを作製し、関節炎における個体レベルでのシノビオリンを介したミトコンドリア制御について検討を行う計画である。
今年度は、①RA患者由来滑膜細胞を採取するとともに、②Prg4プロモーター制御下でCreを発現するマウスをシノビオリンfloxedマウスと掛け合わせることで滑膜細胞特異的シノビオリンKOマウスの作製を開始した。さらに7週齢の時点でタモキシフェンを腹腔内投与しシノビオリンを欠損させ、観察を行った。現在のところ外見上の異常は認められなかった。また、II型コラーゲン誘発関節炎モデルを適応させるためDBA1/J系統への戻し交配を進めた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画した滑膜細胞特異的シノビオリン遺伝子欠損マウスの作製が進行している。ただし、原因不明の哺育中の母親の死亡が発生しているため、予定より交配数を増やすことで対応している。さらに、II型コラーゲン誘発関節炎モデルを適応させるためDBA1/J系統への戻し交配を進めているが、世代が進むにつれて発育不良個体が増えたため、こちらも予定より交配数を増やすことで対応している。
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| 今後の研究の推進方策 |
前年度に引き続き、RA患者由来滑膜細胞の採取、滑膜細胞特異的シノビオリンKOマウスの作成、滑膜細胞特異出来シノビオリンKOマウスのDBA/1J系統への戻し交配を進める。RA患者由来滑膜細胞はミトコンドリアの機能解析を行い、滑膜細胞特異的シノビオリンKOマウスは表現型の解析を行う予定である。
なお、前述のとおり哺育中の母親の死亡や、戻し交配中の発育不良などがあることがわかったため、予定よりも交配数を多くする。
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