膵癌細胞におけるPD-L1発現と腫瘍幹細胞性・上皮間葉転換による悪性形質の解析

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K08706
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 稲熊 真悟 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 高度医療教育研究センター教授 (80410786)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: CD274 / CD70 / 癌間質

研究実績の概要

前年度までに、膵臓癌細胞株のみならず、大腸癌細胞株においてもCD274を高発現する分画が高い浸潤遊走能、細胞分裂能を示すことを見出した。これをもとに、大腸癌細胞株より、様々なCD274発現を示すクローンを樹立し、それらの浸潤遊走能、細胞分裂能とCD274発現との関連を検討するとともに、CD274発現を誘導、および低減させるレンチウイルスを作成し、これら大腸癌クローンにレンチウイルスを感染させ、CD274発現を変化させたことによる表現型の変化もin vitroの実験系を用いて観察している。
膵臓癌細胞株、および大腸癌細胞株より、CD274高発現/低発現分画を抽出し、各分画における遺伝子発現を網羅的に比較解析した。抽出された遺伝子群より、癌幹細胞分画の維持、上皮間葉転換(EMT)、腫瘍細胞の悪性形質の制御に関連すると思われる遺伝子群を抽出し、各分画における遺伝子発現の差異を半定量的RT-PCRにて確認した。発現に差異が確認されたいくつかの遺伝子に関して、その発現を誘導・低減させるレンチウイルスの作成を進めている。
前年度は、愛知医科大学における大腸癌手術症例より大腸癌腫瘍組織アレイを作成し、大腸癌間質線維芽細胞におけるCD70発現が患者の予後を規定することを見出し報告したが、今年度は、米国・ポーランド等の海外研究機関と共同研究を行い、悪性胸膜中皮腫細胞におけるCD70発現が、腫瘍細胞の悪性形質、免疫逃避を促進させ、同腫瘍患者の予後を悪化させていることを明らかにした(J Pathol., 250(2):205-216, 2020)。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

研究施設を異動したこと、およびCOVID-19による動物実験施設の利用制限によって、研究課題の進捗がやや遅れている。よって、本研究課題の研究期間を1年間延長し、引き続き、研究を行うこととした。

今後の研究の推進方策

大腸癌細胞株より樹立されたクローンに、CD274発現を誘導、および低減させるレンチウイルスを感染させ、in vitroにおける表現型の変化を検討することで、CD274分子自体が腫瘍細胞の浸潤遊走能、細胞分裂能、上皮間葉転換(EMT)を制御している可能性を検討する。
CD274高発現/低発現分画において、発現差が確認されたいくつかの遺伝子に関して、それらの遺伝子が、腫瘍細胞の表現型を制御している可能性を検討する。
大腸癌間質線維芽細胞におけるCD70発現の腫瘍病理学的意義を、動物モデルを用いてさらに検討することを予定している。

次年度使用額が生じた理由

研究者の異動、およびCOVID-19による動物実験施設の利用制限に伴う研究計画の遅延により、研究計画を1年間延長することになったため。

研究成果

• [国際共同研究] National Cancer Institute(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: National Cancer Institute
• [国際共同研究] Medical University of Gdansk/Nat. Tuber. and Lung Dis. Res. Inst./Maria Sklodowska-Curie Memorial Inst.(ポーランド)
  • 国名: ポーランド
  • 外国機関名: Medical University of Gdansk/Nat. Tuber. and Lung Dis. Res. Inst./Maria Sklodowska-Curie Memorial Inst.
  • 他の機関数: 2
• [国際共同研究] Otto-von-Guericke University Magdeburg(ドイツ)
  • 国名: ドイツ
  • 外国機関名: Otto-von-Guericke University Magdeburg
• [雑誌論文] Diffuse mesothelin expression leads to worse prognosis through enhanced cellular proliferation in colorectal cancer. (2020)
  • 著者名/発表者名: Inoue S, Tsunoda T, Riku M, Ito H, Inoko A, Murakami H, Ebi M, Ogasawara N, Pastan I, Kasugai K, Kasai K, Ikeda H, Inaguma S.
  • 雑誌名: Oncol Lett. 巻: 19(3) ページ: 1741-1750
  • DOI: 10.3892/ol.2020.11290.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] CD70 expression correlates with a worse prognosis in malignant pleural mesothelioma patients via immune evasion and enhanced invasiveness. (2020)
  • 著者名/発表者名: Inaguma S, Lasota J, Czapiewski P, Langfort R, Rys J, Szpor J, Waloszczyk P, Okon; K, Biernat W, Schrump DS, Hassan R, Kasai K, Miettinen M, Ikeda H.
  • 雑誌名: J Pathol. 巻: 250(2) ページ: 205-216
  • DOI: 10.1002/path.5361.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Colonic Adenocarcinomas Harboring NTRK Fusion Genes: A Clinicopathologic and Molecular Genetic Study of 16 Cases and Review of the Literature. (2020)
  • 著者名/発表者名: Lasota J, Chlopek M, Lamoureux J, Christiansen J, Kowalik A, Wasag B, Felisiak-Golabek A, Agaimy A, Biernat W, Canzonieri V, Centonze G, Chmielik E, Daum O, Dubova M, Dziuba I, Goertz S, Gozdz S, Guttmejer-Nasierowska A, Haglund C, Halon A, Hartmann A, Inaguma S, Miettinen M et. al.
  • 雑誌名: Am J Surg Pathol. 巻: 44(2) ページ: 162-173
  • DOI: 10.1097/PAS.0000000000001377
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] CD70分子はMET-ERK経路の活性化、腫瘍細胞の免疫逃避亢進により悪性胸膜中皮腫患者の予後を悪化させる (2020)
  • 著者名/発表者名: 稲熊真悟、Jerzy Lasota, 池田 洋、笠井謙次、Markku Miettinen、高橋 智
  • 学会等名: 日本病理学会