| 研究課題/領域番号 |
17K08871
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| 研究機関 | 公益財団法人東京都医学総合研究所 |
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研究代表者 |
棟方 翼 公益財団法人東京都医学総合研究所, ゲノム医科学研究分野, 研究員 (50420237)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | B型肝炎ウイルス / E2F / 転写因子 / cccDNA |
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| 研究実績の概要 |
我々は詳細な遺伝子解析を行った結果、B型肝炎ウイルス（HBV）のゲノムDNA上に転写因子E2Fの結合部位候補が5個、遺伝子型間で保存されて存在することを発見した。また、E2F1をノックダウン（KD）した培養細胞では、HBVのX蛋白質と表面蛋白質の発現が抑制されることを見出した。これらの知見は、E2Fファミリーの転写因子がHBVの複製・感染に関与している可能性を強く示唆する。E2F1が宿主のゲノム安定性にも必要であることを考慮すると、HBVのゲノムDNA (cccDNA)の肝細胞での維持にE2Fが関与することも十分考えられる為、この現象の分子機構の解明は慢性HBV感染の新たな治療法の開発に繋がることが期待できる。
我々はさらに、E2F結合サイトを有するHBVゲノム中のプロモーターをルシフェラーゼ・レポーター遺伝子に繋いで解析した結果、期待通り、HBVプロモーターが転写因子E2Fの制御化にあることが複数の肝細胞で証明できた。上記のE2F結合サイトに変異を導入するとE2F応答性が無くなった為、転写因子E2FのHBVに対する効果は、宿主の遺伝子発現を介した間接的なものではなく直接的だと考えられる。E2FがHBVのcccDNAに直接結合することはクロマチン免疫沈降法によっても示された。
E2FはCDKやRbとともにパスウェイを形成して、細胞の増殖に関与する因子である。肝実質細胞は肝臓の中では分化した後ほとんど増殖しないため、E2F転写因子ファミリーの活躍する場は少ないと考えられてきた。しかし、HBV感染等で肝炎が誘発されるとE2Fが活性化されて、細胞増殖やその他の病理学的現象に関与することが今回の解析で示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究計画はここまで順調に進展しており、期待したデータが得られている。今後は更に詳細に分子機構を解析していくことで、HBVとE2Fの肝細胞での相互作用
を明かにして行く。
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでの進捗状況は、当初の計画で予想された通りであることから、研究計画通りに推進していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
使用する試薬がキャンペーン等で予想より安く入手出来たため。
この差額を用いて次年度に消耗品の試薬を購入し、より詳細な解析を行う予定である。
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