EAF2による自己反応性胚中心B細胞の除去機構の解明

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K08878
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 王 継揚 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 特任講師 (80231041)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 胚中心B細胞 / アポトーシス / 転写伸長因子

研究実績の概要

今年度では、EAF2により誘導されるB細胞のアポトーシスがBCL-2により抑制されるかどうかについて解析を行った。胚中心B細胞由来の細胞株Daudiにて、レトロウイルスベクターを用いてEAF2を一過性に過剰発現させると、～30％の細胞がアポトーシスに陥った。この際、同時にBCL-2を発現させると、アポトーシス細胞の割合が半分程度に減少した。即ち、EAF2により誘導されるDaudi細胞のアポトーシスがBCL-2発現により部分的に抑制されることが判明した。今後さらに細胞株の種類を増やして、EAF2とBCL-2の機能的相互作用を明らかいにしていきたい。また、EAF2のターゲット遺伝子についても解析を進めた。その結果、EAF2がB細胞機能に密接にかかわる複数の遺伝子の発現を制御していることが分かった。今年度はさらに加齢EAF2欠損マウスにおいて、新たに以下のことが判明した。12か月齢のEAF2欠損マウスにおいて、腹腔および腋窩リンパ節が著しく肥大し、同月齢のWTマウスのリンパ節に比べ、細胞数が約4倍に増えていた。さらにFACSで調べたところ、EAF2欠損マウスのリンパ節に含まれている細胞の約80-90％がB細胞であった。即ち、加齢に伴い、EAF2欠損B細胞が異常増殖していることが明らかになった。今後、EAF2欠損マウスのリンパ節の組織染色やクローン増殖の有無について解析し、これらの異常増殖しているB細胞の性質を明らかにしていく。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

一部の実験は若干遅れているものの、新たに加齢マウスにおいてB細胞の異常増殖が見られた。全体としては順調に進展している。

今後の研究の推進方策

今後は、１）EAF2とBCL-2ファミリーの機能的相互作用の解析；２）EAF2ターゲット遺伝子の絞り込みと機能解析；３）加齢EAF2欠損マウスのリンパ節で異常増殖しているB細胞の性質の解明。これらの項目に重点を置いて研究を進めていく。

次年度使用額が生じた理由

理由：次年度では、マウスを用いた実験が予定されており、多額なマウス飼育費及び解析費用が必要なため、今年度の実験費用を最小限に抑えた。

使用計画：マウス飼育費、肥大リンパ節の解析、病理切片の作製など。

研究成果

• [雑誌論文] MZB1 promotes the secretion of J chain-containing dimeric IgA and is critical for the suppression of gut inflammation (2019)
  • 著者名/発表者名: Xiong, E., Li, Y., Min, Q., Cui, C., Liu, J., Hong, R., Lai, N., Wang, Y., Sun, J., Matsumoto, R., Takahashi, D., Hase, K., Shinkura, R., Tsubata, T. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 巻: 印刷中 ページ: -
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] The B cell novel protein 1 regulates BCR signaling and B cell apoptosis. (2019)
  • 著者名/発表者名: Hong, R., Lai, N., Ouchida, R., Xiong, E., Zhou, Y., Hikida, M., Tsubata, T., Wang Y.Q. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Eur. J. Immunol. 巻: 印刷中 ページ: -
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Role of the IgM Fc receptor in immunity and tolerance (2018)
  • 著者名/発表者名: Liu, J., Wang, Y., Xiong, E., Hong, R., Ohno, H. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Front. Immunol. 巻: 10 ページ: 529
  • DOI: 10.3389/fimmu.2019.00529
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] A tetrameric form of CD40 ligand with potent biological activities in both mouse and human primary B cells (2018)
  • 著者名/発表者名: Lai, N., Min, Q., Xiong, E., Liu, J., Zhang, L., Yasuda, S. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Mol. Immunol. 巻: 105 ページ: 173-180
  • DOI: 10.1016/j.molimm.2018
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] TLR2 Promotes Glioma Immune Evasion by Downregulating MHC Class II Molecules in Microglia (2018)
  • 著者名/発表者名: Qian, J., Luo, F., Yang, J., Liu, J., Liu, R., Wang, L., Wang, C., Deng, Y., Lu, Z., Wang, Y., Lu, M., Wang, J.-Y. and Chu, Y.
  • 雑誌名: Cancer Immunol. Res. 巻: 6 ページ: 1220-1233
  • DOI: 10.1158/2326-6066.CIR-18-0020
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Kelch-like protein 14 promotes B-1a but suppresses B-1b cell development (2018)
  • 著者名/発表者名: Li, S., Liu, J., Min, Q., Ikawa, T., Yasuda, S., Yang, Y., Wang, Y.-Q., Tsubata, T., Zhao, Y. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Int. Immunol. 巻: 30 ページ: 311-318
  • DOI: 10.1093/intimm/dxy033
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] FcuR promotes the survival and activation of marginal zone B cells and protects mice against bacterial sepsis (2018)
  • 著者名/発表者名: Liu, J., Zhu, H., Qian, J., Xiong, E., Zhang, L., Chu, Y., Kubagawa, H., Tsubata, T. and Wang, J.-Y.
  • 雑誌名: Frontiers in Immunol. 巻: 9 ページ: 160
  • DOI: 10.3389/fimmu.2018.00160
  • 査読あり / 国際共著