麻黄のエンドサイトーシス促進作用を介した薬効発現メカニズムの解明

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09321
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 日向 須美子 北里大学, 東洋医学総合研究所, 室長 (60353471)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 麻黄 / エンドサイトーシス / トランスサイトーシス / CACO-2細胞 / 吸収 / HRP

研究実績の概要

これまでに麻黄エキス(EHE)は、増殖因子受容体のエンドサイトーシスとリソソームでの分解を促進することを見出した（Hyuga, S., et al., Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, in press.）。エンドサイトーシスは、腸管での薬物吸収機構のひとつであるトランスサイトーシスに関与している。タンパク質などの高分子は、腸管上皮細胞にエンドサイトーシスによって取り込まれ、エキソサイトーシスによって生体内へ放出される（トランスサイトーシス）。最近、EHEの活性成分が45kDa以上の高分子縮合型タンニンであり、この成分は病態モデル動物への経口投与で薬効発現することや、EHEと同様にエンドサイトーシスを促進することを見出した（Yoshimura, M., et al., Chem. Pharm. Bull., 68 (2), 140-149, 2020）。そこで、EHEの活性成分がトランスサイトーシスを介して吸収される可能性について検討する事にした。ヒト腸上皮細胞株CACO-2細胞の単層培養を用いたトランスサイトーシスのアッセイ系を構築した。CACO-2を21日間培養し、経上皮電気抵抗(TER)を測定して、200Ω以上になっていることを確認後、トランスサイトーシスのマーカーとして用いられているhorseradish peroxidase (HRP)と12.5, 50 µg/ml EHEをCaco-2単層培養上に添加して4時間培養し、下部ウエルに移行したHRP量を酵素活性測定法で定量した。その結果、HRPの透過率はEHEの添加濃度依存的に増加し、50µg/ml EHEによって、HRPの透過率は約5倍に増加した。これらの結果から、EHEは腸管上皮細胞のトランスサイトーシスを促進していることが示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Effect of Ephedra Herb on Erlotinib Resistance in c-Met-Overexpressing Non-Small-Cell Lung Cancer Cell Line, H1993, through Promotion of Endocytosis and Degradation of c-Met (2020)
  • 著者名/発表者名: Hyuga Sumiko、Hyuga Masashi、Amakura Yoshiaki、Yang Jinwei、Mori Eiko、Hakamatsuka Takashi、Goda Yukihiro、Odaguchi Hiroshi、Hanawa Toshihiko
  • 雑誌名: Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 巻: 2020 ページ: 1～14
  • DOI: https://doi.org/10.1155/2020/7184129
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Quality Evaluation and Characterization of Fractions with Biological Activity from Ephedra Herb Extract and Ephedrine Alkaloids-Free Ephedra Herb Extract (2020)
  • 著者名/発表者名: Yoshimura Morio、Amakura Yoshiaki、Hyuga Sumiko、Hyuga Masashi、Nakamori Shunsuke、Maruyama Takuro、Oshima Naohiro、Uchiyama Nahoko、Yang Jinwei、Oka Hideki、Ito Hideyuki、Kobayashi Yoshinori、Odaguchi Hiroshi、Hakamatsuka Takashi、Hanawa Toshihiko、Goda Yukihiro
  • 雑誌名: Chemical and Pharmaceutical Bulletin 巻: 68 ページ: 140～149
  • DOI: https://doi.org/10.1248/cpb.c19-00761
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Analgesic Effects of Ephedra Herb Extract, Ephedrine Alkaloids?Free Ephedra Herb Extract, Ephedrine, and Pseudoephedrine on Formalin-Induced Pain (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakamori Shunsuke、Takahashi Jun、Hyuga Sumiko、Yang Jinwei、Takemoto Hiroaki、Maruyama Takuro、Oshima Naohiro、Uchiyama Nahoko、Amakura Yoshiaki、Hyuga Masashi、Hakamatsuka Takashi、Goda Yukihiro、Odaguchi Hiroshi、Hanawa Toshihiko、Kobayashi Yoshinori
  • 雑誌名: Biological and Pharmaceutical Bulletin 巻: 42 ページ: 1538～1544
  • DOI: https://doi.org/10.1248/bpb.b19-00260
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] The Adverse Effects of Ephedra Herb and the Safety of Ephedrine Alkaloids-free Ephedra Herb Extract (EFE) (2019)
  • 著者名/発表者名: Odaguchi Hiroshi、Hyuga Sumiko、Sekine Mariko、Nakamori Shunsuke、Takemoto Hiroaki、Huang Xuedan、Oshima Naohiro、Shimada Norimoto、Yang Jinwei、Amakura Yoshiaki、Hyuga Masashi、Uchiyama Nahoko、Kobayashi Yoshinori、Hakamatsuka Takashi、Goda Yukihiro、Hanawa Toshihiko
  • 雑誌名: YAKUGAKU ZASSHI 巻: 139 ページ: 1417～1425
  • DOI: https://doi.org/10.1248/yakushi.19-00122
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 麻黄の主成分・エフェドリンアルカロイドの副作用と新規生薬エキスEFEの開発 (2019)
  • 著者名/発表者名: 日向須美子、小田口浩、花輪壽彦
  • 雑誌名: 別冊BIO Clinica 巻: 8 ページ: 118-122
  • 査読あり
• [学会発表] 麻黄エキス、エフェドリンアルカロイド除去麻黄エキス、エフェドリンアルカロイドのシクロオキシゲナーゼ2阻害作用 (2020)
  • 著者名/発表者名: 南可恵, 日向須美子, 竹内純, 中森俊輔, 宮嶋直紀, 楊金緯, 内山奈穂子, 日向昌司, 大嶋直浩, 天倉吉章, 袴塚高志, 合田幸広, 小田口浩, 花輪壽彦, 小林義典
  • 学会等名: 日本薬学会第140年会
• [学会発表] 麻黄に含まれるエフェドリンアルカロイドの強制水泳試験及び睡眠試験に対する作用の解析 (2020)
  • 著者名/発表者名: 谷垣柊乃介, 尾野颯哉, 渡部浩平, 黄雪丹, 日向須美子, 竹元裕明, 山下忠俊, 楊金緯, 内山奈穂子, 日向昌司, 大嶋直浩, 天倉吉章, 袴塚高志, 合田幸広, 小田口浩, 花輪壽彦, 小林義典
  • 学会等名: 日本薬学会第140年会
• [学会発表] 抗がん剤あるいは分子標的治療薬耐性がんの感受性を回復させる漢方薬～多剤耐性肝臓がんに対する五苓散・沢瀉湯のMDR-1を介した作用、及び、分子標的治療薬耐性非小細胞肺がんに対する麻黄のc-Met・EGFRのダウンレギュレーションを介した作用～ (2019)
  • 著者名/発表者名: 日向須美子
  • 学会等名: 富山大学和漢医薬学総合研究所 第40回特別セミナー
  • 招待講演
• [学会発表] 麻黄によるドーピングとエフェドリンアルカロイド除去麻黄エキス(EFE) (2019)
  • 著者名/発表者名: 日向須美子
  • 学会等名: 日本生薬学会第66年会 シンポジウム
  • 招待講演
• [学会発表] 関節炎モデルマウスの軟骨組織損傷に対するエフェドリンアルカロイド除去麻黄エキスの効果 (2019)
  • 著者名/発表者名: 南可恵、中森俊輔、日向須美子、遠藤真理、宮嶋直紀、檜山美春、風間裕香、竹内純、楊金緯、内山奈穂子、日向昌司、大嶋直浩、天倉吉章、袴塚高志、合田幸広、小田口浩、花輪壽彦、小林義典
  • 学会等名: 日本生薬学会第66年会
• [学会発表] Therapeutic and analgesic effects of Ephedrine alkaloids-free Ephedra Herb extract on complete Freud’s adjuvant-induced arthritis model mouse (2019)
  • 著者名/発表者名: Nakamori, S., Miyajima, N., Hyuga, S., Minami, Y., Kazama, K., Hiyama, M., Endo, M., Yang, J., Oshima, N., Uchiyama, N., Amakura, Y., Hyuga, M., Hakamatsuka, T., Goda, Y., Odaguchi, H., Hanawa, T., and Kobayashi, Y.
  • 学会等名: 67th International Congress and Annual Meeting of the Society for Medicinal Plant and Natural Product Research
  • 国際学会
• [学会発表] 麻黄によるc-Metのダウンレギュレーションのメカニズム (2019)
  • 著者名/発表者名: 日向須美子, 日向昌司, 袴塚高志, 合田幸広, 小田口 浩, 花輪壽彦
  • 学会等名: 第36回和漢医薬学会学術総会
• [学会発表] 悪性腫瘍に対する漢方薬の新たな可能性 (2019)
  • 著者名/発表者名: 日向須美子
  • 学会等名: 第70回日本東洋医学会学術総会 シンポジウム
  • 招待講演
• [学会発表] 麻黄に含まれるエフェドリンアルカロイドの心拍に対する作用の解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 黄雪丹、日向須美子、内山奈穂子、日向昌司、大嶋直浩、天倉吉章、袴塚高志、小田口浩、花輪壽彦、小林義典
  • 学会等名: 第70回日本東洋医学会学術総会
• [備考] 北里大学東洋医学総合研究所 研究部門 臨床研究部
  • URL: https://www.kitasato-u.ac.jp/toui-ken/research/rin_research.html