| 研究課題/領域番号 |
17K09364
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| 研究機関 | 川崎医科大学 |
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研究代表者 |
村尾 高久 川崎医科大学, 医学部, 講師 (40388971)
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| 研究分担者 |
塩谷 昭子 川崎医科大学, 医学部, 教授 (80275354)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | バレット腺癌 / LSBE / SSBE / SERPINB7 / PDZK1 |
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| 研究実績の概要 |
これまでの臨床研究の成果で関連性が確認されたSERPINB7およびSCNN1BのLSBEおよびEACの発生との関連性を確認するとともにその役割について基礎研究を行う。具体的には食道扁平上皮癌および腺癌の細胞株を用いてSERPINB7の遺伝子を導入した強制発現株および対照株を樹立をバレット腺がんの細胞株OE19, OE33を使って試みたが、得られなかった。そのため、第2候補としてPDZK1に注目して同様に発現株の作成を試みたところ、こちらはOE33で安定な発現株が得られた。現在は細胞の集合状態や増殖や遊走を検討している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
SERPINB7の強制発現株は得られなかった。おそらくタンパクがかなり不安定でRNAが発現してもタンパク合成後に分解されやすい可能性がある。実際に、この遺伝子は多方面で注目されてはいるが、タンパクレベルでの解析の報告がない。
そのため同様の傾向を示すPDZK1に注目して同様に発現株の作成を試みたところ、OE33で安定な発現株が得られた。現在は細胞の集合状態や増殖や遊走を検討している。
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| 今後の研究の推進方策 |
細胞の集合状態もOE33の対照株（ベクターのみ）と比べて異なっており、増殖や遊走を検討し、これに何か影響を受ける因子（転写因子やメッセンジャータンパクなど）を探索していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
発現株の作成が遅れたため、次年度使用額が生じた。次年度使用額は30年度交付額と合わせ①細胞形質および集合形態②コロニー形成やMTT法による増殖の違い③フローサイトメトリーによるアポトーシスや細胞周期の比較およびウェスタンブロッティングによる関連因子発現量の変化④Wound-healing assay やInvasion-assayによる遊走（転移）・浸潤能の違いさらに、マイクロアレイ解析による発現株と対照株における遺伝子発現の比較を行い、有意に発現が変化する遺伝子を抽出することなどに使用する予定。
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