バレット食道におけるバレット腺癌リスクマーカーの検討

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09364
• 研究機関: 川崎医科大学
• 研究代表者: 村尾 高久 川崎医科大学, 医学部, 講師 (40388971)
• 研究分担者: 塩谷 昭子 川崎医科大学, 医学部, 教授 (80275354)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: バレット腺癌 / LSBE / SSBE / PDZK1

研究実績の概要

これまでの臨床研究の成果でLSBEやEACとの関連性が認められたSERPINB7に注目し、SERPINB7の遺伝子を導入した強制発現株および対照株の樹立をバレット腺がんの細胞株OE19, OE33を使って試みたが、困難であった。そのため同様の傾向を示すPDZK1に注目して同様に発現株の作成を試みたところ、OE33で安定な発現株が得られた。
PDZK1過剰発現およびノックダウンプラスミドを構築し、OE33に空ベクターをトランスフェクトしたB5細胞と、PDZK1を過剰発現させたP細胞を作成した。それぞれの細胞の増殖能と、Proteasome inhibitor（PSI）によるアポトーシス刺激に対するPDZK1の作用を、Annexin-V、ヨウ化プロピジウム（PI）による2重染色を行い、フローサイトメトリーで解析し調べた。
両細胞で増殖速度に差を認めなかった。DMSOを添加した対象群に比べてPSI刺激群ではB5細胞の有意なアポトーシスの増加を認めたが、P細胞ではアポトーシスの増加抑制を認めた。また、ヘキスト33342とPIによる2重染色でアポトーシス小体を指標とした場合でも同様の結果を認めた。アポトーシス実行蛋白をWestern Blottingで解析したところ、B5細胞においてPSI刺激で増加したCleaved Caspase3の発現は、P細胞では抑制されていた。

研究成果

• [雑誌論文] PDZK1 induces resistance to apoptosis in esophageal adenocarcinoma cells (2021)
  • 著者名/発表者名: Handa Osamu、Goda Kyousuke、Handa Yukiko、Fukushima Shinya、Osawa Motoyasu、Murao Takahisa、Matsumoto Hiroshi、Umegaki Eiji、Fujita Yoshihiko、Nishio Kazuto、Shiotani Akiko
  • 雑誌名: Esophagus 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1007/s10388-021-00819-z
  • 査読あり
• [雑誌論文] Molecular biomarker identification for esophageal adenocarcinoma using endoscopic brushing and magnified endoscopy (2020)
  • 著者名/発表者名: Goda K, Murao T, Handa Y, Katsumata R, Fukushima S, Nakato R, Osawa M, Ishii M, Fujita M, Handa O, Matsumoto H, Fujita Y, Nishio K, Wallace TM, Gomez-Esquivel R, Berzosa M, Wolfsen HC, Wallace MB, Umegaki E, Shiotani A
  • 雑誌名: Esophagus 巻: 18 ページ: 306～314
  • DOI: 10.1007/s10388-020-00762-5
  • 査読あり
• [学会発表] バレット食道のバレット腺癌リスクマーカーPDZK1 の抗アポトーシス能増強作用 (2020)
  • 著者名/発表者名: 半田 修,半田有紀子,合田杏佑,福嶋真弥,平松和恵,萩原喜美子,村尾高久,藤田至彦,塩谷昭子
  • 学会等名: 第38回Cytoprotection研究会
• [備考] 川崎医科大学 消化管内科学教室H.P.
  • URL: https://m.kawasaki-m.ac.jp/classroom/course.php?id=404