| 研究実績の概要 |
本研究では、大腸癌の浸潤・転移におけるCdh1の役割を明らかにすることを目的としており、まず上皮間葉転換（EMT）について検討した。Cdh1をsiRNAで抑制した大腸癌細胞を用いて、wound healing assay、transwell migration assayによる細胞の運動能・浸潤能を評価したが、コントロールと比較して有意な差が見られなかった。そこで、それらの細胞よりRNAを抽出し、qPCRによりSnail、Slug、Zeb1、Zeb2などのEMTで変化する転写因子の発現を確認した。その結果、Cdh1抑制によりSnailの発現だけが有意に亢進し、他の転写因子では有意な差を認めなかった。この結果は、Cdh1が大腸癌におけるEMTに関与しているとするには不十分であり、再実験に加え、今回検討しなかった転写因子についても解析する必要があると思われる。
また、予備実験の結果から、特にWntシグナル経路を介したCdh1の働きに着目おり、Cdh1抑制大腸癌細胞のRNA用いて、Wnt1, 3, 3A, 6, 9A, 9B, 10A, 10BなどのqPCRを行った。現時点では十分に評価できる結果ではなかったため、実験条件について検討を行っている。
一方、動物実験では、Cdh1のリン酸化抑制型変異マウスで大腸癌発癌実験（AOM-DSS）を予定しており、現在、ヘテロマウスの作製が終了した。ホモ変異型マウスを得るために、ヘテロマウス同士の交配、遺伝子型決定を進めている。
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