B型肝炎ウイルスcccDNA排除を目指した新規抗ウイルス治療の開発

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09400
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 森川 賢一 北海道大学, 医学研究院, 助教 (60384377)
• 研究分担者: 坂本 直哉 北海道大学, 医学研究院, 教授 (10334418) ; 須田 剛生 北海道大学, 大学病院, 特任助教 (20447460)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: B型肝炎ウイルス / cccDNA / HBx / DDB1

研究実績の概要

HBV cccDNAの代謝機序の検討:これまでの検討や既知の分子として、Smc5/6、IFN-αを介したAPOBEC3AおよびLymphotoxin-βレセプター(LTBR)を介したAPOBEC3BがcccDNAの分解に関与しているとの報告があるが、その詳細な機序に関しては依然として不明のままである。その中で、Smc5/6に関してはHBx-DDB1（既にクローニング済）との共働によって分解され、その結果cccDNAからの転写が増強し、結果的にHBV複製が増強することが分かってきている。HBxはDDB1と結合することにより、E3ユビキチンライゲース機構をハイジャックし、cccDNAに抑制的に働く宿主制限因子を除去していると考えられる。我々は、各遺伝子型（Ae、Bj、C、D）のHBxをクローン化してタグ化し、DDB1と共遺伝子導入実験を行ったところ、HBVの遺伝子型にかかわらずHBxはDDB1と結合し、Smc5/6を分解していることが判明した。DDB1の領域を分割したクローンを作成し、HBxとの結合を免疫沈降法を用いて検討した。結果、DDB1内での既知のHBxと結合する領域ではなく、これまで既報にない領域内に強い結合を示すことが判明した。現在、DDB1内新規結合領域の同定と、その領域を標的としたペプチド合成を施行中である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

現在は、HBV cccDNA代謝や転写抑制に働く宿主因子に標的を定め、その増強作用や発現上昇を促す新規化合物探索へと注力している。

今後の研究の推進方策

こまでの検討で得られたHBV cccDNAの合成促進や合成阻害に関与する宿主因子、転写活性化促進や抑制に関与する宿主因子、代謝に促進的または阻害的に関与する宿主因子を随時クローニングし分泌型ルシフェラーゼであるガウシアルシフェラーゼをレポーターとしたハイスループットで評価可能な培養細胞システムを構築する。同システムを用いてランダム化学合成化合物ライブラリーや北大低分子化合物ライブラリーを用いて、宿主因子を増強する新規化合物の探索を行う。また同定した化合物は、HBVウイルス培養系を用いて、HBV cccDNAへの効果を検討する。さらにHBV陽性患者の肝組織を用いて、各宿主因子を免疫組織化学法、ウエスタンブロット法、RT-PCR法にて解析し、臨床病理学的特徴を解析する。

研究成果

• [雑誌論文] The Successful Retreatment with Glecaprevir and Pibrentasvir of Genotype 1 or 2 HCV-infected Hemodialysis Patients who Failed to Respond to NS5A and Protease Inhibitor Treatment (2019)
  • 著者名/発表者名: Suda Goki、Nakai Masato、Sho Takuya、Kimura Megumi、Shimazaki Tomoe、Maehara Osamu、Shigesawa Taku、Suzuki Kazuharu、Nakamura Akihisa、Ohara Masatsugu、Umemura Machiko、Kawagishi Naoki、Baba Masaru、Natsuizaka Mitsuteru、Morikawa Kenichi、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya、for the NORTE Study Group
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 58 ページ: 943～947
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.2077-18
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Glecaprevir and Pibrentasvir for Japanese Patients with Human Immunodeficiency Virus and Genotype 3 Hepatitis C Virus Coinfection: A Report of Three Cases (2019)
  • 著者名/発表者名: Sho Takuya、Suda Goki、Kimura Megumi、Shimazaki Tomoe、Maehara Osamu、Shigesawa Taku、Suzuki Kazuharu、Nakamura Akihisa、Ohara Masatsugu、Umemura Machiko、Izumi Takaaki、Kawagishi Naoki、Baba Masaru、Nakai Masato、Natsuizaka Mitsuteru、Morikawa Kenichi、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya、for the NORTE Study Group
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 58 ページ: 797～802
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.1856-18
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Safety and efficacy of elbasvir/grazoprevir for the treatment of chronic hepatitis C: current evidence (2018)
  • 著者名/発表者名: Morikawa Kenichi、Nakamura Akihisa、Shimazaki Tomoe、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Drug Design, Development and Therapy 巻: Volume 12 ページ: 2749～2756
  • DOI: 10.2147/DDDT.S133697
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] L-Carnitine Suppresses Loss of Skeletal Muscle Mass in Patients With Liver Cirrhosis (2018)
  • 著者名/発表者名: Ohara Masatsugu、Ogawa Koji、Suda Goki、Kimura Megumi、Maehara Osamu、Shimazaki Tomoe、Suzuki Kazuharu、Nakamura Akihisa、Umemura Machiko、Izumi Takaaki、Kawagishi Naoki、Nakai Masato、Sho Takuya、Natsuizaka Mitsuteru、Morikawa Kenichi、Ohnishi Shunsuke、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Hepatology Communications 巻: 2 ページ: 906～918
  • DOI: 10.1002/hep4.1207
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Safety and efficacy of elbasvir and grazoprevir in Japanese hemodialysis patients with genotype 1b hepatitis C virus infection (2018)
  • 著者名/発表者名: Suda Goki、Morikawa Kenichi、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya、他
  • 雑誌名: Journal of Gastroenterology 巻: 54 ページ: 78～86
  • DOI: 10.1007/s00535-018-1495-6
  • 査読あり
• [学会発表] Risk assessment of hepatocellular carcinoma in chronic liver disease patients with a combination of liver stiffness measurement and controlled attenuation parameter by FibroScan. (2018)
  • 著者名/発表者名: Morikawa K, Izumi T, Sho T, Suzuki K, Nakamura A, Ohara M, Kawagishi N, Umemura M, Nakai M, Suda G, Ogawa K, Kudo Y, Nishida M, Baba M, Furuya K, Sakamoto N.
  • 学会等名: The European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
  • 国際学会
• [学会発表] Changes in liver steatosis and lipid metabolism accompanied by successful interferon-free DAAs therapy in HCV infected patients; a comprehensive analysis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kawagishi N, Suda G, Morikawa K, Ogawa K, Sakamoto N.
  • 学会等名: The European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
  • 国際学会
• [学会発表] Clinical phase 1b study results for safety, pharmacokinetics and efficacy of ND-L02-s0201, a novel targeted lipid nanoparticle delivering HSP47 SIRNA for the treatment of Japanese patients with advanced liver fibrosis. (2018)
  • 著者名/発表者名: Sakamoto N, Ogawa K, Morikawa K, Suda G, Sho T, Nakai M, Suzuki H, Yamagata N, Tanaka Y, Ying W, Tamura Y, Niitsu Y, Maruyama K.
  • 学会等名: he European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
  • 国際学会
• [学会発表] B型肝性肝炎における核酸アナログ長期治療によるHBs抗原減少効果の検討. (2018)
  • 著者名/発表者名: 梅村真知子, 森川賢一,坂本直哉.
  • 学会等名: 第42回日本肝臓学会東部会
• [学会発表] B型肝炎ウイルス発現培養細胞のプロテオメタボロミクス解析. (2018)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一, 梅村真知子, 坂本直哉.
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
• [図書] 今日の処方. 改訂第6版. C型肝炎. (2019)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一
  • 総ページ数: 881
  • 出版者: (株)南江堂