B型肝炎ウイルスcccDNA排除を目指した新規抗ウイルス治療の開発

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09400
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 森川 賢一 北海道大学, 医学研究院, 助教 (60384377)
• 研究分担者: 坂本 直哉 北海道大学, 医学研究院, 教授 (10334418) ; 須田 剛生 北海道大学, 大学病院, 特任助教 (20447460)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: HBV cccDNA

研究実績の概要

ここまでの検討でHBV cccDNAに関与する宿主因子をいくつか同定できた。特に、HBVの宿主制限因子として、Structural Maintenance of Chromosomes (Smc) 5/6の複合体に着目し、研究を進めた。HBx蛋白がDamage specific DNA binding protein1 (DDB1)と結合することにより、ユビキチンE3リガーゼシステムをハイジャックし、Smc 5/6複合体を分解することにより、自身の持続感染に有利な方向に導いていることが、いくつかの実験系で確認された。本年度は、HBxとDDB1の結合阻害により、HBV複製の抑制が可能かどうか検討した。遺伝子型Ae、C、DのHBxをクローニングし、細胞内に遺伝子導入したところ、Smc 5/6複合体の分解効率に差異は認められず、この事象は汎遺伝子型に認められることが判明した。次にsiRNAを用いて、DDB1およびSmc 6を抑制したところ、HBVの複製に影響をおよぼすことが判明した。HBxとDDB1の結合部位を確認するため、DDB1の野生型をクローニングした。またDDB1の各構成体を作成し、HBxとDDB1の野生型および各構成体との免疫沈降実験を行った。これまで、HBxとの結合領域が報告されているBPA＋3カ所の結合領域を含むクローンより、BPCとHBxの結合が、強いことが確認された。またHBｘ蛋白が、これまで未知のDDB1のBPC領域と強く結合することが明らかとなった。DDB1のBPC領域内のHBVとの詳細な結合部位を同定し、同部位を標的としたペプチド合成を行い、新規創薬形成の基板を目指している。DDB1とHBxの結合が阻害できれば、宿主制限因子であるSmc 5/6複合体が回復し、cccDNAの排除に寄与する可能性を有すると考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Comparative Glycomic Analysis of Sialyl Linkage Isomers by Sialic Acid Linkage-Specific Alkylamidation in Combination with Stable Isotope Labeling of α2,3-Linked Sialic Acid Residues (2019)
  • 著者名/発表者名: Hanamatsu Hisatoshi、Nishikaze Takashi、Tsumoto Hiroki、Ogawa Koji、Kobayashi Takashi、Yokota Ikuko、Morikawa Kenichi、Suda Goki、Sho Takuya、Nakai Masato、Miura Nobuaki、Higashino Kenichi、Sekiya Sadanori、Iwamoto Shinichi、Miura Yuri、Furukawa Jun-ichi、Tanaka Koichi、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Analytical Chemistry 巻: 91 ページ: 13343～13348
  • DOI: 10.1021/acs.analchem.9b03617
  • 査読あり
• [雑誌論文] Correlation between Liver Elasticity by Ultrasound Elastography and Liver Functional Reserve (2019)
  • 著者名/発表者名: Sugiura Ryo、Kuwatani Masaki、Nishida Mutsumi、Hirata Koji、Sano Itsuki、Kato Shin、Kawakubo Kazumichi、Nakai Masato、Sho Takuya、Suda Goki、Morikawa Kenichi、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Ultrasound in Medicine & Biology 巻: 45 ページ: 2704～2712
  • DOI: 10.1016/j.ultrasmedbio.2019.06.407
  • 査読あり
• [雑誌論文] Quantifying Protein-Specific N-Glycome Profiles by Focused Protein and Immunoprecipitation Glycomics (2019)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi Takashi、Ogawa Koji、Furukawa Jun-ichi、Hanamatsu Hisatoshi、Hato Megumi、Yoshinaga Tomoyo、Morikawa Kenichi、Suda Goki、Sho Takuya、Nakai Masato、Higashino Kenichi、Numata Yoshito、Shinohara Yasuro、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Journal of Proteome Research 巻: 18 ページ: 3133～3141
  • DOI: 10.1021/acs.jproteome.9b00232
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of resistance‐associated variants in genotype 2?hepatitis C virus on viral replication and susceptibility to antihepatitis C virus drugs (2019)
  • 著者名/発表者名: Suda Goki、Kimura Megumi、Shigesawa Taku、Suzuki Kazuharu、Nakamura Akihisa、Ohara Masatsugu、Kawagishi Naoki、Nakai Masato、Sho Takuya、Maehara Osamu、Shimazaki Tomoe、Morikawa Kenichi、Natsuizaka Mitsuteru、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 49 ページ: 1275～1285
  • DOI: 10.1111/hepr.13401
  • 査読あり
• [雑誌論文] Entecavir treatment of hepatitis B virus‐infected patients with severe renal impairment and those on hemodialysis (2019)
  • 著者名/発表者名: Suzuki Kazuharu、Suda Goki、Yamamoto Yoshiya、Furuya Ken、Baba Masaru、Kimura Megumi、Maehara Osamu、Shimazaki Tomoe、Yamamoto Koji、Shigesawa Taku、Nakamura Akihisa、Ohara Masatsugu、Kawagishi Naoki、Nakai Masato、Sho Takuya、Natsuizaka Mitsuteru、Morikawa Kenichi、Ogawa Koji、Sakamoto Naoya、for the NORTE Study Group
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 49 ページ: 1294～1304
  • DOI: 10.1111/hepr.13399
  • 査読あり
• [雑誌論文] Assessing the risk of hepatocellular carcinoma by combining liver stiffness and the controlled attenuation parameter (2019)
  • 著者名/発表者名: Izumi Takaaki、Sho Takuya、Morikawa Kenichi、Shigesawa Taku、Suzuki Kazuharu、Nakamura Akihisa、Ohara Masatsugu、Kawagishi Naoki、Umemura Machiko、Shimazaki Tomoe、Kimura Megumi、Nakai Masato、Suda Goki、Natsuizaka Mitsuteru、Ogawa Koji、Kudo Yusuke、Nishida Mutsumi、Ono Kota、Baba Masaru、Furuya Ken、Sakamoto Naoya
  • 雑誌名: Hepatology Research 巻: 49 ページ: 1207～1217
  • DOI: 10.1111/hepr.13391
  • 査読あり
• [学会発表] Long-term effect of nucleos(t)ide analogs on hepatitis B surface antigen in chronic hepatits B patients. (2019)
  • 著者名/発表者名: 1.Morikawa K, Umemura M, Ogawa K, Shigesawa T, Suzuki K, Nakamura A, Ohara M, Kawagishi N, Shimazaki T, Kimura M, Izumi T, Nakai M, Sho T, Suda G, Natsuizaka M, Ono K, Murata K, Sugiyama M, Mizokami M, Sakamoto N.
  • 学会等名: The European Association for the Study of the Liver (EASL) International Liver Congress.
  • 国際学会
• [学会発表] B型慢性肝炎の核酸アナログ治療におけるインターフェロンλ3の役割の検討. (2019)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一, 小川浩司, 坂本直哉.
  • 学会等名: 第55回日本肝臓学会総会
• [図書] 今日の治療指針-私はこう治療している-. 2020年度版 (2020)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一他
  • 総ページ数: 2115
  • 出版者: (株)医学書院
• [図書] 内科学書 (2019)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一他
  • 総ページ数: 509
  • 出版者: (株)中山書店
• [図書] 今日の処方. 改訂第6版 (2019)
  • 著者名/発表者名: 森川賢一他
  • 総ページ数: 881
  • 出版者: (株)南江堂
• [備考] 北海道大学大学院医学研究院内科学分野消化器内科学教室
  • URL: https://halo.med.hokudai.ac.jp/