肝硬変症に対する高機能細胞製剤の予期的培養法とセルフリー肝臓再生療法の開発

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09428
• 研究機関: 山口大学
• 研究代表者: 高見 太郎 山口大学, 大学院医学系研究科, 講師 (60511251)
• 研究分担者: 藤澤 浩一 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (00448284) ; 松本 俊彦 山口大学, 大学院医学系研究科, 助教 (70634723) ; 山本 直樹 山口大学, 大学教育機構, 准教授 (90448283)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 肝硬変症

研究実績の概要

我々が実施している非代償性肝硬変症に対する自己骨髄細胞を用いた再生療法（先進医療B「自己骨髄細胞投与療法」と臨床研究「培養自己骨髄間葉系幹細胞
(MSC)を用いた低侵襲肝臓再生療法」）の知見から、さらに治療効果と安全性を高めた肝臓再生療法を開発するには「高機能・高品質な骨髄MSC」が必要であると考え、研究を進めている。また、これまでにThioacetamide(TAA)で酸化ストレスを誘導した初代肝細胞と骨髄MSCの共培養実験から骨髄MSCには肝細胞由来Reactive Oxygen Species(ROS)産生を抑制する直接的作用があることや、「高い細胞増殖活性とコラゲナーゼ活性を持つ骨髄MSCを培養可能な培養皿（特許第5935477号）」の解析から「骨髄MSC増殖促進因子(Mesenchymal proliferation factors, MPFs)」を見出している。
今年度は、全骨髄細胞由来因子を含む培地（全骨髄調整培地）で培養した骨髄MSCは、通常培地と比べて良好な増殖能とコロニー形成能を長期にわたって維持したが、細胞外小胞を除去することにより、これらの効果は減弱することを見出した。さらに全骨髄調整培地による骨髄MSC培養はミトコンドリア機能を改善させることも確認し、関与するmicroRNAを複数同定した。このように、全骨髄細胞由来microRNAによって骨髄MSCミトコンドリア機能が改善（維持）するため、この方法で培養した骨髄MSCは肝臓再生療法の有効な細胞源となりうる。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

新たに全骨髄細胞由来因子を含む培地（全骨髄調整培地）で培養した骨髄MSCに注目して解析した結果、高機能な骨髄MSCが培養可能となることが明らかになったため。

今後の研究の推進方策

最終年度は、全骨髄細胞由来因子を含む培地（全骨髄調整培地）で培養した骨髄MSCの肝線維化改善効果を動物モデルを用いて検証し論文化する。

研究成果

• [雑誌論文] Liver regeneration therapy through the hepatic artery-infusion of cultured bone marrow cells in a canine liver fibrosis model. (2019)
  • 著者名/発表者名: Nishimura T, Takami T, Sasaki R, Aibe Y, Matsuda T, Fujisawa K, Matsumoto T, Yamamoto N, Tani K, Taura Y, Sakaida I.
  • 雑誌名: PLoS One. 巻: 14(1) ページ: e0210588
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0210588.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Usefulness of Adult Medaka Fish as a Model for the Evaluation of Alcoholic Fatty Liver. (2019)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa K, Takami T, Nagatomo T, Fukui Y, Hoshida H, Saeki I, Matsumoto T, Hidaka I, Yamamoto N, Sakaida I.
  • 雑誌名: Alcohol. 巻: 77 ページ: 147-154
  • DOI: 10.1016/j.alcohol.2019.01.005.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Canine Liver Fibrosis Model to Assess the Functions of Infused Autologous Bone Marrow-Derived Cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takami T, Tani K, Taura Y, Sakaida I.
  • 雑誌名: Methods Mol Biol. 巻: 1905 ページ: 201-209
  • DOI: 10.1007/978-1-4939-8961-4_18.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Liver stiffness measured by transient elastography as predictor of prognoses following portosystemic shunt occlusion. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa T, Sasaki R, Nishimura T, Matsuda T, Maeda M, Iwamoto T, Saeki I, Hidaka I, Takami T, Sakaida I.
  • 雑誌名: J Gastroenterol Hepatol. 巻: 34(1) ページ: 215-223
  • DOI: 10.1111/jgh.14410.
  • 査読あり
• [雑誌論文] 非代償性肝硬変症に対する自己骨髄細胞を用いた肝臓再生療法 (2019)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、坂井田 功
  • 雑誌名: 消化器病学サイエンス 巻: 3(1) ページ: 27-31
• [雑誌論文] No Muscle Depletion with High Visceral Fat as a Novel Beneficial Biomarker of Sorafenib for Hepatocellular Carcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Saeki I, Yamasaki T, Maeda M, Kawano R, Hisanaga T, Iwamoto T, Matsumoto T, Hidaka I, Ishikawa T, Takami T, Sakaida I.
  • 雑誌名: Liver Cancer. 巻: 7(4) ページ: 359-371
  • DOI: 10.1159/000487858.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Analysis of tolvaptan non-responders and outcomes of tolvaptan treatment of ascites. (2018)
  • 著者名/発表者名: Iwamoto T, Maeda M, Saeki I, Hidaka I, Tajima K, Ishikawa T, Takami T, Sakaida I.
  • 雑誌名: J Gastroenterol Hepatol. 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1111/jgh.14524.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Treatment strategies for advanced hepatocellular carcinoma: Sorafenib vs hepatic arterial infusion chemotherapy. (2018)
  • 著者名/発表者名: Saeki I, Yamasaki T, Maeda M, Hisanaga T, Iwamoto T, Fujisawa K, Matsumoto T, Hidaka I, Marumoto Y, Ishikawa T, Yamamoto N, Suehiro Y, Takami T, Sakaida I.
  • 雑誌名: World J Hepatol. 巻: 10(9) ページ: 571-584
  • DOI: 10.4254/wjh.v10.i9.571.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Assessment of high-fat-diet-induced fatty liver in medaka. (2018)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa K, Takami T, Fukui Y, Nagatomo T, Saeki I, Matsumoto T, Hidaka I, Yamamoto N, Okamoto T, Furutani-Seiki M, Sakaida I
  • 雑誌名: Biol Open. 巻: 7(11) ページ: -
  • DOI: 10.1242/bio.031534.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Deferasirox, an oral iron chelator, with gemcitabine synergistically inhibits pancreatic cancer cell growth in vitro and in vivo. (2018)
  • 著者名/発表者名: Shinoda S, Kaino S, Amano S, Harima H, Matsumoto T, Fujisawa K, Takami T, Yamamoto N, Yamasaki T, Sakaida I.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 9(47) ページ: 28434-28444
  • DOI: 10.18632/oncotarget.25421.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Comparison of patients with hepatic encephalopathy and those with gastric varices before and after balloon-occluded retrograde transvenous obliteration. (2018)
  • 著者名/発表者名: Ishikawa T, Sasaki R, Nishimura T, Matsuda T, Maeda M, Iwamoto T, Saeki I, Hidaka I, Takami T, Sakaida I.
  • 雑誌名: Hepatol Res. 巻: 48(12) ページ: 1020-1030
  • DOI: 10.1111/hepr.13199.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Blood free-circulating DNA testing by highly sensitive methylation assay to diagnose colorectal neoplasias. (2018)
  • 著者名/発表者名: Suehiro Y, Hashimoto S, Higaki S, Fujii I, Suzuki C, Hoshida T, Matsumoto T, Yamaoka Y, Takami T, Sakaida I, Yamasaki T.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 9(24) ページ: 16974-16987
  • DOI: 10.18632/oncotarget.24768.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Evaluation of the effects of ascorbic acid on metabolism of human mesenchymal stem cells. (2018)
  • 著者名/発表者名: Fujisawa K, Hara K, Takami T, Okada S, Matsumoto T, Yamamoto N, Sakaida I.
  • 雑誌名: Stem Cell Res Ther. 巻: 9(1) ページ: 93
  • DOI: 10.1186/s13287-018-0825-1.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 肝臓再生医療と実践的人材育成 ～培養自己骨髄細胞を用いた低侵襲肝臓再生療法の臨床実施と大学初となる臨床培養士育成コースの開設～ (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、坂井田 功
  • 雑誌名: 臨床検査学教育 巻: 10(2) ページ: 185-190
  • 査読あり
• [学会発表] 当科における非代償性肝硬変症に対する培養自己骨髄間葉系幹細胞を用いた再生治療 (2019)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、坂井田 功
  • 学会等名: 第18回日本再生医療学会総会
• [学会発表] 山口大学における臨床培養士養成課程と学会連携 (2019)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、野島 順三、坂井田 功
  • 学会等名: 第18回日本再生医療学会総会
• [学会発表] Direct infusion of cultured autologous bone marrow-derived mesenchymal stem cells offers higher therapeutic efficacy than conventional peripheral infusion in liver fibrosis animal models (2018)
  • 著者名/発表者名: Takami T, Sasaki R, Nishimura T, Matsuda T, Fujisawa K, Matsumoto T, Yamamoto N, Sakaida I.
  • 学会等名: 6th Annual Midwest Conference on Cell Therapy and Regenerative Medicine
  • 国際学会
• [学会発表] 抗線維化療法としての自己骨髄細胞を用いた非代償性肝硬変症に対する再生療法の臨床実施と展開 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、坂井田 功
  • 学会等名: 第54回日本肝臓学会総会
• [学会発表] 非代償性肝硬変症に対する自己骨髄由来細胞を用いた再生療法の臨床実施 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、坂井田 功
  • 学会等名: 第53回日本アルコール・アディクション医学会学術総会
• [学会発表] 非代償性肝硬変症に対する培養自己骨髄間葉系幹細胞肝動脈投与療法の開発 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、坂井田 功
  • 学会等名: JDDW 2018
• [学会発表] 非代償性肝硬変に対する自己骨髄由来細胞を用いた再生療法の臨床実施 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、坂井田 功
  • 学会等名: 第104回日本消化器病学会総会
• [学会発表] アルコール性肝障害の病態解明のためのエタノール含有水飼育メダカモデルの作出 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、藤澤 浩一、坂井田 功
  • 学会等名: 第53回日本アルコール・アディクション医学会学術総会
• [学会発表] 非代償性肝硬変に対する自己骨髄由来細胞を用いた肝臓再生療法の臨床実施 (2018)
  • 著者名/発表者名: 高見 太郎、松本 俊彦、久永 拓郎、藤澤 浩一、石川 剛、坂井田 功
  • 学会等名: 第115回日本内科学会総会
• [学会発表] microRNA142-3pによる肝線維化抑制機構の解明 (2018)
  • 著者名/発表者名: 松本 俊彦、高見 太郎、坂井田 功
  • 学会等名: 第50回日本結合組織学会
• [備考] 山口大学研究推進機構 再生・細胞治療研究センター
  • URL: http://rcasi.kenkyu.yamaguchi-u.ac.jp/saisei.php