S1PR2が原発性胆汁性胆管炎の疾患特異性と病態に及ぼす影響の解明と治療への応用

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09458
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 川田 一仁 浜松医科大学, 医学部附属病院, 助教 (90722968)
• 研究分担者: 小林 良正 浜松医科大学, 医学部, 助教 (50252185) [辞退] ; 則武 秀尚 浜松医科大学, 医学部, 助教 (10467235)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 原発性胆汁性胆管炎 / S1PR2

研究実績の概要

本研究では原発性胆汁性胆管炎(PBC)肝内胆管細胞のS1PR2の発現や機能を検討し疾患特異性から病態解明まで行い、さらに新規治療を創出することが目標である。
in vitroで、Human intrahepatic cholangiocarcinoma cell lineであるHuCC-T1 cellsを用いて、肝内胆管細胞へのLPS刺激によるT細胞の遊走能に及ぼす影響について、CX3CL1とCCL2の発現を中心にS1PR2 antagonist JTEが及ぼす作用について検討した。2019年度に引き続き、LPS刺激によるHuCC-T1 cells中のCX3CL1、CCL2の上昇を抑制するメカニズムについて検討した。まず初めに焦点を当てたNFkBを介さないことを確認にしたので、次にSTAT3に着目した。HuCCT-1の核内のリン酸化STAT-3の発現をWestern Blotで確認した。JTEを投与する事でHuCCT-1の核内のリン酸化STAT-3の発現は行進し、LPSと共にJTEを投与しても同様にリン酸化STAT-1の発現が行進していた。従って、JTEはNFkBを介さず、STAT-3をリン酸化することでLPSにより発現が上昇したCX3CL1とCCL2の発現を抑制していることが示唆された。また、2019年度と同様にHuCC-T1 cellsとヒトT cell lymphomaのcell lineであるJurkat cellsを用いてChemotaxis assayを行った。HuCCT-1のLPS刺激によりケモカイン産生が行進され、Jurkat cellsの遊走能が優位に上昇するが、LPS+JTEにて上昇していた遊走能は優位に低下した。以上より、JTEが肝内胆管細胞のLPS誘導CX3CL1とCCL2産生をSTAT-3のリン酸化を介して抑制し、T 細胞の遊走を低下させることが解明された。