| 研究実績の概要 |
肺線維症は肺の線維化を主体とする難治性，進行性の致死的疾患で，発症や進展機序の更なる解明が望まれている。現在のところ，何らかの刺激によって上皮障害が惹起され，続いて線維芽細胞が活性化して異常な組織修復として線維化が進展すると考えられている。本研究では，肺線維化形成過程における内皮細胞の機能に着目し、エアロゾル化ブレオマイシン肺線維化モデルを作成し、線維化肺組織より回収した肺血管内皮細胞を用いて，肺線維化過程における内皮細胞機能を検討した。前年までの検討において、C57BL/6マウスにエアロゾル化したブレオマイシンを経気道的に注入し、ブレオマイシン誘導性肺線維
化モデルマウスを作成した。HE染色およびトリクローム染色で肺組織を病理学的に検討したところ、細胞浸潤は投与後7日で観察され、線維化はブレオマイシン投与21日後で著明であった。これら組織学的変化はびまん性に生じており、エアゾル化ブレオマイシン投与によって肺線維症モデルが形成可能なことが確認された。線維化の形成は、気管支肺胞洗浄の細胞解析やヒドロキシプロリン測定にても確認された。続いて同組織より血管内皮細胞の分離を試みた。研究計画にそった方法で抗体を用いて高純度の血管内皮細胞の分離が可能であった。この細胞よりRNAを抽出しRT-PCRを実施、TGFβやCTGFなどの線維化メディエーターや炎症性サイトカインの発現を確認、内皮細胞の間葉転換を生じている事が明らかとなった。これらの変化はTGF-β1添加により増幅され、CTGF, PDGFの発現、α-SMA発現、コラーゲン産生が有意に増加し、NO, PGI2の産生は低下した。Twist-1はBLM誘導性肺線維症マウスの血管内皮細胞で有意に上昇していた。この結果の一部は学会、論文発表を行った。
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