小胞体カルシウムイオン調節を基盤にしたアルドステロン合成制御機構の解明

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K09883
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 沖 健司 広島大学, 病院(医), 講師 (30638995)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: アルドステロン / 原発性アルドステロン症 / 二次性高血圧

研究実績の概要

１．CALN1を介したアルドステロン合成機構(In vitro解析)
アルドステロン産生腺腫(APA)の原因遺伝子であるKCNJ5変異をレンチウイルスプラスミドのpLX303-KCNJ5-T158Aを，HEK293を用いてレンチウイルスを作製し，副腎皮質癌細胞株(HAC15)に導入し，APAモデル細胞株(KCNJ5-HAC15)を作製した．この細胞株でCALN1発現量は，コントロールに比較し，1.3倍に有意に増加していた (P <0.05)．さらに，KCNJ5-HAC15にレンチウイルスを用いて，CALN1発現量を抑制した細胞株(KCNJ5-shCALN1)を作製した．KCNJ5-shCALN1において，KCNJ5変異により上昇したアルドステロン合成は，コントロール細胞と同程度にまで完全に抑制され(P<0.01)，さらに，ER内Ca2+もコントロール細胞と同程度にまで抑制された．
HAC15にCALN1を抑制させたshCALN1-HAC15を作製した．shCALN1-HAC15とそのコントロールであるHAC15に，アルドステロン合成を促進するアンギオテンシンIIを投与したところ，shCALN1-HAC15ではアルドステロン合成が有意に抑制された．
２．食塩摂取抑制下ラットにおけるCALN1発現とアルドステロン合成(In vivo解析)
Dahl食塩感受性ラットを低濃度食塩群(0.2% Na+)または通常食群の2群に分けて，23日間飼育した．低濃度食塩で飼育したラットの副腎皮質球状帯は肥厚しており，CYP11B2発現やCALN1発現量は著明に増加していた．また，通常食で飼育したラットでは，CYP11B2発現は軽度であり，CALN1発現はみられなかった．

研究成果

• [国際共同研究] University of Mississippi Medical Center(米国)
  • 国名: 米国
  • 外国機関名: University of Mississippi Medical Center
• [雑誌論文] Endoplasmic Reticulum Chaperone Calmegin Is Upregulated in Aldosterone-Producing Adenoma and Associates With Aldosterone Production. (2020)
  • 著者名/発表者名: Itcho K, Oki K, Gomez-Sanchez CE, Gomez-Sanchez EP, Ohno H, Kobuke K, Nagano G, Yoshii Y, Baba R, Hattori N, Yoneda M.
  • 雑誌名: Hypertension 巻: 75 ページ: 492-499
  • DOI: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.119.14062.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] A Rare Case of IgG4-Related Disease Presenting as a Unilateral Severe Dacryoadenitis Complicated by Hypophysitis and Hypertrophic Pachymeningitis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yoshida Y, Kondo T, Hosokawa Y, Oki K, Yukawa K, Araki K, Kohno H, Kuranobu T, Tokunaga T, Oi K, Sugimoto T, Oda K, Nojima T, Hirata S, Sugiyama E.
  • 雑誌名: J Clin Rheumatol 巻: - ページ: E-pub
  • DOI: 10.1097/RHU.0000000000000989.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Elevated Plasma Renin Activity Caused by Accelerated-malignant Hypertension in a Patient with Aldosterone-producing Adenoma Complicated with Renal Insufficiency. (2019)
  • 著者名/発表者名: Maruhashi T, Amioka M, Kishimoto S, Ikenaga H, Oki K, Ishida M, Kihara Y, Higashi Y.
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 58 ページ: 3107-3111
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.2327-18.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Alteration of gut microbiota by a Westernized lifestyle and its correlation with insulin resistance in non-diabetic Japanese men. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yamashita M, Okubo H, Kobuke K, Ohno H, Oki K, Yoneda M, Tanaka J, Hattori N.
  • 雑誌名: J Diabetes Investig 巻: 10 ページ: 1463-1470
  • DOI: 10.1111/jdi.13048.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Associations of nutrient intakes with obesity and diabetes mellitus in the longitudinal medical surveys of Japanese Americans. (2019)
  • 著者名/発表者名: Sugihiro T, Yoneda M, Ohno H, Oki K, Hattori N.
  • 雑誌名: J Diabetes Investig 巻: 10 ページ: 1229-1236
  • DOI: 10.1111/jdi.13010.
  • 査読あり
• [学会発表] 夜間ACTH高値が副腎性サブクリニカルクッシング症候群診断に与える影響 (2019)
  • 著者名/発表者名: 馬場 隆太, 沖 健司, 児玉 尭也, 一町 澄宜, 小武家 和博, 長野 学, 大久保 博史, 大野 晴也, 米田 真康
  • 学会等名: 第92回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] ATP1A1変異によるアルドステロン産生腺腫増殖機構の解明 (2019)
  • 著者名/発表者名: 小武家 和博, 沖 健司, 馬場 隆太, 一町 澄宜, 長野 学, 大久保 博史, 大野 晴也, 米田 真康
  • 学会等名: 第92回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] 分子シャペロンCLGNはアルドステロン産生腫瘍に特異的に発現しアルドステロン合成に関与する (2019)
  • 著者名/発表者名: 一町 澄宜, 沖 健司, 馬場 隆太, 小武家 和博, 大久保 博史, 大野 晴也, 米田 真康
  • 学会等名: 第92回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] 副腎静脈サンプリングにおける最適な局在判定基準は (2019)
  • 著者名/発表者名: 沖 健司
  • 学会等名: 第92回日本内分泌学会学術総会
• [学会発表] ER chaperone calmegin is upregulated in aldosterone-producing adenoma and associates with aldosterone production (2019)
  • 著者名/発表者名: Kenji Oki, Kiyotaka Itcho, Celso E. Gomez-Sanchez, Elise P. Gomez-Sanchez, Kazuhiro Kobuke, Ryuta Baba, Haruya Ohno, Masayasu Yoneda, Noboru Hattori
  • 学会等名: Progress in Primary Aldosteronisum 6
  • 国際学会