2018 年度実施状況報告書

新規抗骨髄腫薬を用いたTh1様γδT細胞の誘導法とその抗骨髄腫活性の増強法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	17K09956
研究機関	徳島大学
研究代表者	三木浩和徳島大学, 病院, 講師 (50511333)
研究期間 (年度)	2017-04-01 – 2020-03-31
キーワード	γδT細胞 / 多発性骨髄腫 / 免疫調節薬
研究実績の概要	健常人から採取した末梢血単核球にHMB-PP、IMiDs（LEN, POM）を用いて、体外で誘導したγδT細胞は、NKG2DやDNAM-1の発現が高くIFN-γの発現が高いTh1様であった。またTh1様γδT細胞および抗HM1.24抗体は、骨髄腫細胞および骨髄腫前駆細胞に対して強い細胞傷害活性をもたらした。一方で、骨髄腫患者から採取した末梢血単核球を用いて誘導したγδT細胞では、IMiDsを用いても誘導効率は悪く、DNAM-1やNKG2Dの発現も減弱していた。特に未治療の骨髄腫患者と比較して、プロテアソーム阻害薬、デキサメサゾンを投与後の患者ではγδT細胞の誘導効率は低下していた。さらに健常人から採取した末梢血単核球から誘導したγδT細胞は、ストローマ細胞存在下では、PD-1が高発現していることも見出した。現在、γδT細胞の増幅にPD-1阻害抗体を用いて、より増幅・活性化が増強しないかどうか検討中である。またγδT細胞の抗骨髄腫効果はPim阻害薬との併用でより増強した。さらにHDAC阻害薬であるpanobinostatは、骨髄腫細胞表面のMICA/B, ULBPなどのNKG2Dリガンドの発現を高めた。以上からPim阻害薬やpanobinostatなどは、γδT細胞の抗腫瘍効果を高める可能性があり、現在これらの抗骨髄腫薬とγδT細胞および抗HM1.24抗体との併用療法について検討中である。またPim阻害薬がγδT細胞の抗腫瘍効果を増強させる機序、またHDAC阻害薬がNKG2Dリガンドの発現を高める機序ならびに抗PD-1阻害抗体を併用することで抗HM1.24抗体のADCC活性を高めることが可能かどうかなども実験中である。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 3: やや遅れている理由検討1)のTh1様活性を高めたγδT細胞の体外増幅に関しては、健常人および骨髄腫患者検体を用いた実験が滞りなく終了しているが、検討2)3)のHM1.24抗体を用いたin vitroでの検討が十分に遂行できていない。従って、検討4)骨髄腫骨髄微小環境のTh1様γδT細胞を介する抗腫瘍活性に及ぼす影響、検討5) Th1様γδT細胞とヒト化抗HM1.24抗体併用の抗骨髄腫活性の生体内効果の検討、などが実験途中であり、実験の再現性や条件設定などの評価項目が複数ある。
今後の研究の推進方策	検討4)骨髄腫骨髄微小環境のTh1様γδT細胞を介する抗腫瘍活性に及ぼす影響に関しては、IMiDs、HDAC阻害薬、プロテアソーム阻害薬の他、Pim阻害薬やTAK-1阻害薬などの化合物も加えて、抗骨髄腫活性を検討する予定である。検討5)Th1様γδT細胞とヒト化抗HM1.24抗体併用の抗骨髄腫活性の生体内効果の検討に関しては、動物モデルを用いた研究であるため、in vitroでの条件をよく推敲した上で、実験を計画する。