研究課題/領域番号 |
17K10068
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研究機関 | 国立研究開発法人国立成育医療研究センター |
研究代表者 |
藤原 成悦 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 免疫アレルギー・感染研究部, 特任研究員 (30173488)
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研究分担者 |
中村 浩幸 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 免疫アレルギー・感染研究部, 室長 (70256866)
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研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | 先天性サイトメガロウイルス感染症 / サイトメガロウイルス / CMV / SLITRK6 / 難聴 |
研究実績の概要 |
先天性サイトメガロウイルス(CMV)感染は、神経・感覚器障害(精神発達遅滞や感音性難聴など)をはじめさまざまな臓器障害を引き起こすことが知られており、感染児のQOLに多大な影響をおよぼす。しかし、先天性CMV感染がどのようなメカニズムで神経・感覚器障害を引き起こすかについては不明な点が多い。我々はこれまでにヒト神経系培養細胞を用いたin vitro CMV感染モデルを構築・解析した結果、遺伝性難聴の原因遺伝子の一つであるSLITRK6の発現をCMVが抑制することを見出した。また、神経系細胞におけるSLITRK6発現変動の意義を明らかにするために、ヒト神経系培養細胞に対してSLITRK6発現ベクターあるいはSLITRK6 shRNA発現ベクターを導入し、SLITRK6発現を人為的に変動させた細胞を作出した。本年度は、これらの細胞について、神経系細胞の形態や生存率の違い、またこれらの細胞にCMVを実験的に感染させた場合の細胞障害性の程度など、CMVによる細胞障害性とSLITRK6発現レベルとの間に関連があるか検討を進めた。また、マウスサイトメガロウイルス (MCMV)をマウス脳に感染させると神経系障害や難聴を発症することが知られていることから、MCMVによる神経・感覚器障害とSLITRK6発現変動の関連を解析する目的で、マウス培養細胞を用いたMCMV感染系構築に向けた実験に着手した。これらの解析を進めることで、CMVによるSLITRK6発現抑制が神経系細胞の機能やCMV生活環に与える影響について明らかにする予定である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
神経系細胞の機能やCMV生活環に対するSLITRK6発現変動の影響について解析を進めた。また、MCMVを用いたin vitro実験を行うための感染実験系構築に着手した。
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今後の研究の推進方策 |
神経系細胞の機能およびCMV生活環に対して、SLITRK6の発現変動がどのような影響を及ぼすかについて引き続き解析を進める予定である。また、MCMVがマウスに引き起こす神経・感覚器障害のメカニズムにSLITRK6発現変動が関与するのかについても、実験系を確立し解析に着手する予定である。
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次年度使用額が生じた理由 |
本年度は、ヒト神経系培養細胞について形態や生存率の違いや、CMVを実験的に感染させた場合の細胞障害性の程度など、CMVによる細胞障害性とSLITRK6発現レベルとの間に関連があるか検討を進めた。これらの実験は当初の予定より少量の試薬で完了することができたため、使用した研究費が計画を下回った。一方来年度は、実験結果の整理のために人件費を必要とするため、本年度に未使用となった研究費を充てる計画である。
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