| 研究課題/領域番号 |
17K10253
|
|---|
| 研究機関 | 順天堂大学 |
|---|
研究代表者 |
安藤 智暁 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (10724669)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
|
| キーワード | マスト細胞 / ゲノム編集 / アレルギー |
|---|
| 研究実績の概要 |
本研究はアトピー性皮膚炎モデルにおいてマスト細胞の活性化・抑制に関わる分子をin vivoでスクリーニングする方法の開発を行う。平成29年度にIL1RL1分子 の欠損マウスが利用可能となり、野生型とIL1RL1欠損マウスにおいてアトピー性皮膚炎モデルを誘導したところ、本モデルにおいてもIL1RL1分子が何らかの役割 を果たしていることが判明した。IL1RL1はマスト細胞のアレルギー炎症における活性化や分化に重要であることが示されているほか、ヒトのアトピー性皮膚炎と の関連性がゲノムワイド関連解析(GWAS)で指摘されている分子である。平成30年度はまず実際にIL1RL1分子がマスト細胞のin vivoでの活性化と関連するかの 検討を行ったところ、IL1RL1分子の可溶型に既報とは異なる作用があることが示唆され、さらなる検討が必要であることが判明した。 また、活性化状態の記録方法についての検討を行い、細胞内染色によるマスト細胞の活性化指標となる分子の発現を確認したところ、in vitroでの検討ではMCP- 1が鋭敏な指標となる可能性が示唆された。 また、本研究のスクリーニングにおいてはゲノム編集の手法を用いる予定であるが、この手法においてはCas9蛋白質をマスト細胞に発現させることが必要にな る。平成29年度、レトロウイルスベクターも作製することに成功したが、平成30年度にその有用性を検討したところ、残念ながら少数のスクリーニングには対応 できるが、ゲノムワイドな規模のスクリーニングに対応できる効率に至らず、さらに検討を重ねる必要がある。平成31年度は、マスト細胞の活性化状態の記録方法について、バリエーションを可能な限り検討する予定であったが、 必要なプラスミドの作成に予定よりも時間を要した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
平成31年度は、マスト細胞の活性化状態の記録方法について、バリエーションを可能な限り検討する予定であったが、 必要なプラスミドの作成に予定よりも時間を要したため、延長を申請するに至った。
|
| 今後の研究の推進方策 |
マスト細胞の活性化状態の記録方法について、バリエーションを可能な限り検討する。その際、平成31年度から作製中のプラスミドを評価し、in vivoの実験に進んでいきたい。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
ベクター作製の遅延により残額が生じた。これらの評価に費用が必要となるため、これに使用する予定で ある。
|
