| 研究課題/領域番号 |
17K10277
|
|---|
| 研究機関 | 宮崎大学 |
|---|
研究代表者 |
石田 康 宮崎大学, 医学部, 教授 (20212897)
|
|---|
| 研究分担者 |
西森 利数 宮崎大学, 医学部, 特別教授 (20112211)
蛯原 功介 宮崎大学, 医学部, 助教 (20510720)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
|
| キーワード | パーキンソン病 / L-DOPA / アストロサイト / オプトジェネティックス / 6-hydroxydopamine / 不随意運動 |
|---|
| 研究実績の概要 |
1)6-hydroxydopamineによる片側パーキンソン病モデルラットの作製:三種混合麻酔薬(塩酸メデトミジン，ミダゾラム，酒石酸ブトルファノール)投与下， 脳定位的に6-OHDAを片側の内側前脳束へ微量注入することにより，中脳ドーパミン（DA）神経を化学破壊した6-OHDAラット(片側パーキンソン病モデルラット)を作製した。6-OHDA注入2週間後に，メタンフェタミン誘起回転運動を観察し行動の偏位を定量化し，一定の基準に満たなかった動物は本実験より除外した。
2)L-DOPA反復投与に伴う不随意運動の観察:L-DOPA投与に際しては，まず芳香族L-アミノ酸脱炭酸酵素阻害薬(末梢におけるL-DOPAの代謝を阻害し，L-DOPAがより効率的に脳血管関門を通過できる)のbenserazide (15 mg/kg, i.p.)，引き続きL-DOPA methyl ester (15 mg/kg, i.p.)を1日1回投与した。なお，この実験では，L-DOPA反復投与に伴う不随意運動を観察する目的で，L-DOPA投与1日，8日，15日，最終日に，各ラットのL-DOPA投与後3時間の行動観察を施行した。不随意運動の観察には，Cenciらの提唱した評価尺度(AIMs)を用いた。
3)免疫組織化学法(免疫染色)により，片側パーキンソン病モデルラットの線条体その他の脳部位において，L-DOPA急性投与および繰り返し投与によりc-Fos，FosB等の転写調節因子が異なる様式で発現することを明らかにした。
オプトジェネティックス実験に関する予備実験は完了し，技術的の問題が概ねないことを確認した。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
以前，ウイルスベクターを取り扱うための実験室を確保できずに，当該作業に関しては手つかずの状況であった。現在，早急に当該実験可能な環境整備を行っている。更に，2019年度末以降，COVID-19により動物実験の実施が困難となってしまった。
|
| 今後の研究の推進方策 |
前項で記載したとおり，最近までウイルスベクターを取り扱うための実験室を確保できずに，当該作業に関しては手つかずの状況であった。現在，早急に当該実験可能な環境整備を行っている。2020年度は，片側パーキンソン病モデルラット作成，L-DOPA投与実験等を含め，ウイルスベクター注入等のオプトジェネティック実験も推進する予定である。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
2019年度に関して，研究代表者である石田（精神科診療科長，宮崎大学安全衛生保健センター長），研究分担者のひとりである蛯原（精神科病棟医長）が，それぞれの診療・運営業務で多忙であり，想定外に研究業務に費やす時間を確保できなかった。また，主要な連携研究者である船橋英樹が2019年4月よりマイアミ大学留学中で，当初の研究計画に遅延が生じた。船橋は，2020年10月には本研究に復帰出来る予定である。
|
