ヒト型糖尿病ブタモデルの作出とガラス化凍結保存膵島細胞シートの移植後の検証

2017 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K10527
• 研究機関: 明治大学
• 研究代表者: 長屋 昌樹 明治大学, 研究・知財戦略機構, 特任教授 (90329300)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 膵ランゲルハンス島移植 / 糖尿病 / 細胞シート / 凍結保存 / ガラス化凍結 / 病態モデルブタ

研究実績の概要

ヒトの体重に見合ったヒト型糖尿病ミニブタを作出、ガラス化凍結にて保存可能な膵ランゲルハンス島（膵島）シートを作製、糖尿病ブタへの膵島シートの移植後の機能の検証を目的とする。海外ではドナー膵が出現した場合でもバーチャル・クロスマッチ陰性の患者が待機リストにおらずドナー膵を無駄にする例が多いため、凍結保存膵島シートが移植後至適に機能すれば、新たな治療の可能性が生まれる。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

ヒトサイズ糖尿病ミニブタの作成は、凍結融解したHepatocyte Nuclear Factor 1a トランスジェニック(tg)ブタの精子と卵丘卵子複合体をマイクロミニブタの卵管膨大部に注入、本作業で胎仔を無事に獲得した。ブタ膵島シートの作成は、Wild typeではすでに成功しているが、計画に使用する膵島シートの作成は pancreatic and duodenal homeobox 1(PDX1)tgブタより膵島分離を行い、緑色発光した膵島シートを作成することとしている。本ブタの作出が遅れている。

今後の研究の推進方策

Pdx1 Venus Tgブタの作出を試みる頻度を多くする。

研究成果

• [雑誌論文] Diabetic phenotype of transgenic pigs introduced by dominant-negative mutant hepatocyte nuclear factor 1α. (2017)
  • 著者名/発表者名: Umeyama K, Nakajima M, Yokoo T, Nagaya M, Nagashima H.
  • 雑誌名: J Diabetes Complications. 巻: 31 ページ: 796-803.
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2016.12.017. Epub 2016 Dec 24
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Host conditioning and rejection monitoring in hepatocyte transplantation in humans (2017)
  • 著者名/発表者名: Soltys KA, Setoyama K, Tafaleng EN, Soto Gutierrez A,, Fong J, Fukumitsu K, Nishikawa T, Nagaya M,
  • 雑誌名: J Hepatology 巻: 66 ページ: 987-1000
  • DOI: 10.1016/j.jdiacomp.2017.01.025. Epub 2017 Feb 13.
  • 査読あり / 国際共著
• [学会発表] 子宮全摘法とアイソレーター内飼育によるDPFブタの生産. (2018)
  • 著者名/発表者名: 中野和明, 梅山一大, 長谷川航希, 小見山泰史, 井上亮, 小林良奈, 山田孟,湯, 松成ひとみ, 渡邊將人, 長屋昌樹, 西村崇史, 佐竹典明, 三宅眞佐男, 長嶋比呂志
  • 学会等名: 第20回日本異種移植研究会
• [学会発表] 膵臓形成不全トランスジェニックブタの重症糖尿病モデルとしての可能性. (2018)
  • 著者名/発表者名: 長谷川航希, 中野和明, 梅山一大, 梅木育磨, 福田暢, 岡本一駿, 松成ひとみ, 渡邊將人, 小見山泰史, 湯, 山田孟, 長屋昌樹, 小林英司, 中内啓光, 長嶋比呂志
  • 学会等名: 第20回日本異種移植研究会
• [学会発表] ドミナントネガティブ変異HNF1A遺伝子導入トランスジェニックブタの表現型と合併症 (2017)
  • 著者名/発表者名: 1.梅山一大, 中島正巳, 中野和明, 渡邊將人, 松成ひとみ, 横尾隆, 長屋昌樹, 長嶋比呂志
  • 学会等名: . In:2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)