| 研究課題/領域番号 |
17K10556
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| 研究機関 | 福島県立医科大学 |
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研究代表者 |
大竹 徹 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (50363750)
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| 研究分担者 |
岡山 洋和 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (20583397)
立花 和之進 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (50583598)
齋藤 元伸 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (90611749)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | Wnt/β-cateninシグナル / トリプルネガティブ乳癌 |
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| 研究実績の概要 |
生物学的・臨床学的悪性度が高く、治療抵抗性であるトリプルネガティブ乳癌（TNBC)では、Wnt/β-cateninシグナルが顕著に活性化しており、またそのシグナル異常は発がんの極めて初期段階に生じている。さらにWnt/β-cateninシグナルがNatural compoundにより抑制されると考えられているため、副作用の少ないこれらの薬剤投与により、TNBCの発癌抑制につながると考えられる。
まずはじめに、Wntシグナルが標的とする炎症関連遺伝子を抽出するために、転写レベルでのWntシグナルの活性化状態を確認した。TCGA data portal、cBioPortal (MSKCC)などのアプリケーション、乳癌TCGA論文のsupplementary dataから800例以上の乳癌サンプルの各種データを取得し、MSigDB (Broad Institute)のhallmark gene setsから、Wnt/β-cateninシグナルの活性化により発現が上昇する42遺伝子を抽出し、TCGAのRNAシークエンスデータを用いて算出した。この解析により、トリプルネガティブ乳癌は他のサブタイプの乳癌に比べ、有意にWntシグナル関連遺伝子の転写活性が高いことを確認した。42遺伝子からさらにRNAシークエンスデータおよびRPPAによるタンパク発現データから更なる候補の抽出および絞りこみを行っている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
Wnt/β-cateninシグナルが標的とする関連遺伝子の抽出および解析は予定通り進行しているが、乳癌培養細胞株、乳癌発癌モデル細胞株を用いた分子生物学的検討に遅れが生じている。
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| 今後の研究の推進方策 |
乳癌細胞株、乳癌発現モデル細胞株を用いて、siRNAによるβ-cateninのノックダウン実験およびWntシグナルを阻害するNatural compoundを投与し、転写レベル、タンパクレベルでのWntシグナル阻害を確認し、その機能を研究する。
さらに当院での乳癌手術検体のホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE)切片を用いて、Wnt/β-cateninシグナル関連遺伝子の免疫染色を行い、各種臨床病理学的因子や夜ごとの関連を統計学的に検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度はTCGA data portal、cBioPortal(MSKCC)などのウェブアプリケーションや乳癌TCGA論文のデータを用いて、Wntシグナル解析アルゴリズムにより遺伝子発現のデータの収集、解析を行ったた。
研究の若干の遅れがあり、次年度より細胞株を用いた分子生物学的研究並びに手術検体のFFPEを用いた免疫組織染色を本格的に行うため、細胞株や抗体、機能評価アッセイキットの購入等の経費の計上が考えられる。
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