| 研究課題/領域番号 |
17K10603
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| 研究機関 | 和歌山県立医科大学 |
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研究代表者 |
尾島 敏康 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60448785)
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| 研究分担者 |
中森 幹人 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (10322372)
中村 公紀 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (80364090)
山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | iPS細胞 / 樹状細胞 / がんワクチン / アデノウイルスベクター / 腫瘍抗原 / 細胞傷害性T細胞 |
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| 研究実績の概要 |
平成30年度は担癌患者iPS-TAA-DC in vitro刺激で得られたCTLのTAA特異的細胞傷害活性の解析を行った．
本研究はiPS-DC癌ワクチン療法の臨床応用に向けてのpreclinical studyであり，当大学倫理委員会の承認を得ている(approval number 1594, UMIN: 000021106)．
6例の大腸癌患者がエントリーした．6例すべての切除標本よりCTOS法を用いて、cell line化に成功し，そのうち4例がCEA蛋白陽性 2例がWT1蛋白陽性であった．4例のCEA陽性大腸癌患者のおのおののiPS-DCにアデノウイルスベクターを用いて遺伝子導入し，その導入効率をFACSにて検討した．のこりの2名は同様にWT1遺伝子を導入し，その発現を確認した．その後，担癌患者6名のおのおののPBMCに対してiPS-TAA-DCのin vitro刺激を3回行い，28日かけてbulk CTLを誘導，その後MACSにてCD8+CTLを選別し，effector細胞とした．Target細胞はCTOS法で得られたcell lineとし，細胞傷害活性をCr release assay法を用いて検討した．結果として，全例にTAA特異的なCTLが誘導され，おのおののcell lineに対して強力な殺腫瘍効果を認めた．現在，テトラマーassayを行い，population数のチェックを行っている．しかし，数回行ったが，明らかなテトラマー陽性細胞は検出できず，現在は抗体を変更したり，assay法を工夫しながら研究を進めているところである．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成30年度は担癌患者iPS-TAA-DC in vitro刺激で得られたCTLのTAA特異的細胞傷害活性の解析を行った．結果6例の大腸癌患者よりTAA特異的なCTLが誘導された．6例中4例が初回のCr release assayで作業仮説どうりの結果が得られ，2例も2回目のassayで結果が得られた．計画通りに研究は進んだ考えている．現在そのpopulationの解析を行うためテトラマーassayを行っているが，現時点ではテトラマー陽性細胞はdetectできず，繰り返し研究を行っている．
以上のごとく，おおむね順調に研究は進展していると評価した．
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| 今後の研究の推進方策 |
平成31年度も引き続き，新たな癌患者からのCTOS法を用いたcell lineの作成，iPS-DCの樹立，in vitroでのCTL誘導を行っていく．現在停滞しているテトラマー陽性細胞の検出に関しては，抗体を変更し，行っている．また，これまでは大腸癌でのみCTOS法が成功しており，平成31年度は胃癌患者および膵癌患者からのCTOS法確立を目指す．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
今年度末の論文投稿料の使用計画にずれ（年度末の投稿にて支払いが新年度になってしまった）、次年度繰越金が発生しました．
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