膵癌幹細胞におけるクロライドイオン輸送体の発現機能解析と分子標的治療への応用

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K10710
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 當麻 敦史 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 講師 (30516191)
• 研究分担者: 大辻 英吾 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (20244600) ; 塩崎 敦 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (40568086)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 膵臓外科学 / 癌幹細胞 / イオンチャネル

研究実績の概要

ヒト膵癌細胞株PK59をALDEFLUOR kitで処理し、ALDH高発現細胞をsorting後、sphere形成能を有する細胞のみを分離し、癌幹細胞を培養。樹立した癌幹細胞を接着プレートで培養し、再分化能を持つことを確認。また、PK59由来癌幹細胞株が親株に比して、5FUに対する耐性を有することを確認。PK59由来癌幹細胞株と親株での遺伝子発現をmicroarrayを用いた網羅的解析により比較検討したところ、種々のイオン輸送体が癌幹細胞において高発現していることを確認した。その中から、特に電位依存性カリウムチャネルの発現上昇に着目し研究を進めた。KCNB、KCNC、KCNDのmRNAレベルがPK59由来癌幹細胞株で著明に上昇していることをRT-PCRで確認。電位依存性カリウムチャネルの阻害薬である4-aminopyridineをPK59由来癌幹細胞株と親株に各々投与すると、癌幹細胞株においてより強い増殖抑制効果が確認された。4-aminopyridineは多発性硬化症に対し臨床で用いられている薬剤である。更に、PK59細胞を4-aminopyridineで処理後、ヌードマウスに皮下接種したところ、皮下腫瘍の成長が有意に抑制された。これらの研究成果は既に学会で発表し、論文としてまとめて英文雑誌に現在投稿中である。
一方で、消化器癌におけるANO9 (Ann Surg Oncol. 2020)、LRRC8A (Am J Pathol. 2019)、TRPV2 (Sci Rep. 2019)、Sodium iodide symporter (Gastric Cancer. 2019)などのイオン輸送体の発現機能解析・臨床病理学的意義を検証するとともに、低浸透圧刺激後の温度・イオン輸送体・水輸送体を介する細胞容積調節機構を解明した(Int J Oncol. 2019)。

研究成果

• [雑誌論文] ANO9 Regulated Cell Cycle in Human Esophageal Squamous Cell Carcinoma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Katsurahara K, Shiozaki A, Kosuga T, Kudou M, Shoda K, Arita T, Konishi H, Komatsu S, Kubota T, Fujiwara H, Okamoto K, Kishimoto M, Konishi E, Marunaka Y, Otsuji E.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: ー ページ: ー
  • DOI: 10.1245/s10434-020-08368-y.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Case of a 5mm Rectal Neuroendocrine Tumor(G1)with Lymph Node Metastasis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Takemoto K, Harada K, Toma A, Imura T, Ochiai T, Otsuji E.
  • 雑誌名: Gan To Kagaku Ryoho. 巻: 47 ページ: 652-654
  • 査読あり
• [雑誌論文] The expression and role of TRPV2 in esophageal squamous cell carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kudou M, Shiozaki A, Yamazato Y, Katsurahara K, Kosuga T, Shoda K, Arita T, Konishi H, Komatsu S, Kubota T, Fujiwara H, Okamoto K, Kishimoto M, Konishi E, Marunaka Y, Otsuji E.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 9 ページ: 16055
  • DOI: 10.1038/s41598-019-52227-0.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Effect of low temperature on the regulation of cell volume after hypotonic shock in gastric cancer cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Shiozaki A, Yamazato Y, Kosuga T, Kudou M, Shoda K, Arita T, Konishi H, Komatsu S, Kubota T, Fujiwara H, Okamoto K, Marunaka Y, Otsuji E.
  • 雑誌名: Int J Oncol. 巻: 55 ページ: 905-914
  • DOI: 10.3892/ijo.2019.4853.
  • 査読あり
• [雑誌論文] LRRC8A Expression Influences Growth of Esophageal Squamous Cell Carcinoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Konishi T, Shiozaki A, Kosuga T, Kudou M, Shoda K, Arita T, Konishi H, Komatsu S, Kubota T, Fujiwara H, Okamoto K, Kishimoto M, Konishi E, Marunaka Y, Otsuji E.
  • 雑誌名: Am J Pathol. 巻: 189 ページ: 1973-1985
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2019.06.006.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Functional analysis and clinical significance of sodium iodide symporter expression in gastric cancer. (2019)
  • 著者名/発表者名: Shiozaki A, Ariyoshi Y, Iitaka D, Kosuga T, Shimizu H, Kudou M, Konishi T, Shoda K, Arita T, Konishi H, Komatsu S, Kubota T, Fujiwara H, Okamoto K, Kishimoto M, Konishi E, Marunaka Y, Ichikawa D, Otsuji E.
  • 雑誌名: Gastric Cancer. 巻: 22 ページ: 473-485
  • DOI: 10.1007/s10120-018-0874-2.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Outcome of a second hepatectomy in octogenarians with hepatocellular carcinoma recurrence: single centre's experience. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ochiai T, Inoue H, Watanabe N, Ito H, Toma A, Morimura R, Ikoma H, Otsuji E.
  • 雑誌名: ANZ J Surg. 巻: 89 ページ: 1270-1274
  • DOI: 10.1111/ans.15330.
  • 査読あり
• [学会発表] 食道扁平上皮癌におけるTRPV2発現の臨床病理学的意義についての検討 (2019)
  • 著者名/発表者名: 加藤俊治、塩﨑敦、山里有三、小菅敏幸、小西博貴、窪田健、藤原斉、岡本和真、岸本光夫、森村玲、生駒久視、村山康利、栗生宜明、中西正芳、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 膵癌幹細胞における4-aminopyridineの抗腫瘍効果について (2019)
  • 著者名/発表者名: 小西智規、塩﨑敦、小菅敏幸、工藤道弘、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 食道癌におけるLeucine-Rich Repeat-Containing protein 8A（LRRC8A）発現と機能解析 (2019)
  • 著者名/発表者名: 倉島研人、塩﨑敦、小菅敏幸、工藤道弘、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 食道扁平上皮癌におけるAno9発現の意義 (2019)
  • 著者名/発表者名: 葛原啓太、塩﨑敦、工藤道弘、庄田勝俊、有田智洋、小菅敏幸、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] ヒト食道扁平上皮癌におけるNa+/K+-ATPase発現と役割 (2019)
  • 著者名/発表者名: 小林利行、塩﨑敦、工藤道弘、小菅敏幸、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、小松周平、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、岸本光夫、小西英一、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 食道扁平上皮癌におけるCLC-2（Chloride Channel protein 2）発現の意義 (2019)
  • 著者名/発表者名: 満田雅人、塩﨑敦、小菅敏幸、工藤道弘、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、岸本光夫、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 食道扁平上皮癌におけるCFTR（cystic fibrosis transmembrane conductance regulator）の発現の意義 (2019)
  • 著者名/発表者名: 松本順久、塩﨑敦、工藤道弘、小菅敏幸、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、岸本光夫、大辻英吾．
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 胃癌細胞の低浸透圧処理後容積変化における低温刺激の影響 (2019)
  • 著者名/発表者名: 中村慶、塩﨑敦、小菅敏幸、山里有三、工藤道弘、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、大辻英吾.
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] 低浸透圧による細胞容積制御を介した胃癌細胞へのパクリタキセル取り込み増強効果 (2019)
  • 著者名/発表者名: 小菅敏幸、塩﨑敦、工藤道弘、飯高大介、小林利行、竹本健一、庄田勝俊、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、岡本和真、藤原斉、小松周平、市川大輔、大辻英吾.
  • 学会等名: 第119回日本外科学会定期学術集会
• [学会発表] High CD44 gastric cancer stem cells are suppressed by voltage gated Ca2+ channel blocker. (2019)
  • 著者名/発表者名: Keita Katsurahara, Atsushi Shiozaki, Michihiro Kudou, Katsutoshi Shoda, Tomohiro Arita, Toshiyuki Kosuga, Hirotaka Konishi, Ryo Morimura, Yasutoshi Murayama, Takeshi Kubota, Masayoshi Nakanishi, Hitoshi Fujiwara, Eigo Otsuji.
  • 学会等名: 第78回日本癌学会学術総会
• [学会発表] The development of novel targeted therapies to over-expressed ion transporters in esophageal cancer stem cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Yoshihisa Matsumoto, Michihiro Kudou, Atsushi Shiozaki, Toshiyuki Kosuga, Ryo Morimura , Yasutoshi Murayama, Yoshiaki Kuriu , Hisashi Ikoma, Takeshi Kubota, Masayoshi Nakanishi, Hitoshi Fujiwara, Kazuma Okamoto, Eigo Otsuji.
  • 学会等名: 第78回日本癌学会学術総会
• [学会発表] 胃癌におけるヨウ化ナトリウム共輸送体のIFNシグナルを介する腫瘍制御機構の解明 (2019)
  • 著者名/発表者名: 塩﨑敦、有吉要輔、小菅敏幸、工藤道弘、有田智洋、小西博貴、森村玲、村山康利、栗生宜明、生駒久視、窪田健、中西正芳、藤原斉、岡本和真、大辻英吾．
  • 学会等名: 第57回日本癌治療学会学術集会