| 研究課題/領域番号 |
17K10951
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
柿木 良介 近畿大学, 医学部, 教授 (20314198)
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| 研究分担者 |
赤木 將男 近畿大学, 医学部, 教授 (00273441)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 人工神経 / 末梢神経再生 / 同種神経基底膜 / 骨髄間葉系幹細胞 / 血流 |
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| 研究実績の概要 |
【目的】我々は、ナーブリッジ（東洋紡）の外筒管(PGA)を神経誘導管として使用し、腓腹動静脈を外筒に接するように留置し、同種神経基底膜移植と骨髄間葉系細胞移植を組み合わせた新しい人工神経鞘を作成した。この人工神経は自家神経移植術の代替療法となり得るものと仮説を立てて、ラット坐骨神経20mm欠損モデルを用いて検討した。
【方法】実験１：ナーブリッジ外筒管の血行透過性評価の為、ルイスラットの坐骨神経に5mm欠損モデルを作成した。3mm径の神経誘導管内に腓腹動静脈を血管茎として挿入したモデルと神経誘導管の外筒に血管茎を沿わせたモデルを作成し神経再生、神経管内の血流を評価した。
実験２：DAラット坐骨神経を界面活性剤処理して作成した同種神経基底膜を、23mm長のナーブリッジ外筒内に2本挿入した。ルイスラット坐骨神経に20mm欠損を作成し、神経導管内の同種神経基底膜にルイスラット大腿骨より採取した骨髄間葉系細胞3X107個を移植し、外筒管に腓腹動静脈を沿わせた人工神経鞘で、ラット坐骨神経20mm欠損を架橋し神経再生を評価した。
【結果】実験１：両群間で電気生理学的、組織形態学的に有意差を認めなかった。また抗血管内皮抗体を用いて、検索したところ再生神経内の血流に有意差はなかった。
実験２：外付け20mm欠損モデルでは、電気生理学的検査において、処置後12週で、運動神経伝導速度は自家神経群よりは劣るが、足部内転筋誘発電位では有意差は認めなかった。術後24週では、電気生理学的検査で自家神経移植群と比較し有意差はあるものの約7割までの神経再生を有していた。
【考察】先行実験において、ナーブリッジは血管透過性を有する神経誘導管であることが示唆された。長い神経欠損には、神経再生の足場となる基底膜の重要性が示唆され、また骨髄間葉系細胞の生着・生存率に影響を与えると考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
人工神経内に移植した同種神経基底膜の抗原性に関しては、抗CD8免疫染色を、同種神経基底膜の残存する細胞外マトリックスについては、抗ラミニン抗体を用いて検索しているが、まだ実験中である。またGFPルイスラットより採取した骨髄間葉系細胞の培養を行い、移植実験を近々に実施する予定であるが、まだ手付かずの状態である。
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| 今後の研究の推進方策 |
同種神経基底膜の抗原性に関しては、抗CD8免疫染色を用いて、また細胞外マトリックスの存在については、抗ラミニン抗体を用いて検索する。それぞれ自家神経片、同種神経片と比較する。またGFPルイスラットより採取した骨髄間葉系細胞を人工神経内に移植し、移植神経内の移植骨髄幹細胞数についても検索する予定であり、完成し次第論文として結果を公表する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
GFPラットを用いた実験がまだできていないため、本年度は余剰資金が生じたと考える。
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