| 研究課題/領域番号 |
17K11064
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| 研究機関 | 藤田医科大学 |
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研究代表者 |
下村 泰代 藤田医科大学, 医学部, 准教授 (80534031)
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| 研究分担者 |
西田 修 藤田医科大学, 医学部, 教授 (20208185)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 好中球細胞外トラップス / オートファジー / 敗血症性DIC / 多臓器不全 / トロンボモジュリン |
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| 研究実績の概要 |
昨年に引き続き、LPS誘導型敗血症モデルマウスを使用して、リコンビナントトロンボモジュリン（rTM）投与の有無で比較検討した。
本モデルマウスの生存率はLPS投与後72時間で50%となるが、rTM投与群では72時間後は100%、96時間後では80%と改善を認めた。敗血症の病態悪化の原因の一つが、サイトカインストームや多臓器不全である。その状態を解明するべく、フローサイトメトリーにより血液中の炎症性ならびに抗炎症性サイトカイン濃度を測定した。rTM投与によりこれらのサイトカイン濃度の上昇は抑制された。
多臓器不全のターゲット臓器である肺・腎・肝臓のNETs形成はNETs構成成分であるヒストンの蓄積状態で評価した。蛍光免疫染色法でヒストンを検出したところ、ヒルトンの蓄積は抑えられていた。以上の結果からLPS誘導型敗血症モデルマウスにおけるrTMによる生存率改善には、サイトカインストームの抑制と多臓器不全のターゲット臓器の抗炎症効果によるもではないかと期待できる。引き続き臓器内でのオートファジーの状態を検証中である。
また、ヒト末梢血液を用いた研究では、好中球の精製と培養系を確立できたため、現在Autophagyの発現の検討を行っている。
本研究を通じて、NETs形成やオートファジーが敗血症の重症化に関与している可能性が見いだせてきた。結果の一部を論文を投稿したが、revise（校正要求）となったため引き続き研究を行っていく。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
本研究で計画した一部の結果は出ており、論文投稿したが、reviseとなり、追加実験が必要となった。
また、学会などで他のグループの結果から、使用しているオートファジー検出用試薬を見直し、他の試薬でデータの確認も行いたいと考えている。
このような理由から当初の予定であった研究期間を1年延長することとなった。
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| 今後の研究の推進方策 |
論文投稿できるだけのデータは集まっているが、今後は、学会や論文からオートファジーやヒストン、NETsの検出において、現在使用しているものより感度や再現性が優れている試薬や方法を取り入れ検討していく予定である。
また本研究を通じて、新たな物質がNETs形成に関与している可能性が見えてきた。
研究期間を延長することで、敗血症の病態をさらに深く解明していく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本研究で計画した一部の結果は出ており、論文投稿したが、reviseとなり、追加実験が必要となった。このまま結果を蓄積し、まとめて他の雑誌への投稿も検討したいと考えた。
またデータの再現性を確認するための追加実験を行いたい。
学会で他のグループの結果から、使用しているオートファジー検出用試薬を見直し、他の試薬の使用してデータの確認も行うため。
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