研究課題/領域番号 |
17K11182
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研究機関 | 鳥取大学 |
研究代表者 |
武中 篤 鳥取大学, 医学部, 教授 (50368669)
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研究分担者 |
本田 正史 鳥取大学, 医学部, 准教授 (20362890)
久留 一郎 鳥取大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60211504)
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研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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キーワード | 排尿機能 / 再生医療 / 生理学 / 排尿筋低活動 / 脂肪幹細胞 |
研究実績の概要 |
本研究は、申請者が現在まで行ってきた正常下部尿路機能および下部尿路機能障害に関する基礎研究手法を用いて、脂肪幹細胞シートの排尿筋低活動に対する有効性を包括的に明らかにし、本治療法を臨床応用レベルまで展開するための研究基盤を確立することが目的である。 Lewisラットの鼠径部皮下脂肪組織から脂肪由来の幹細胞(ASC)を分離培養して細胞シートを作成した。雌のLewisラットを、対象群(n=8)、偽手術群(n=8)、凍結障害群(n=8)、凍結障害 + ASCシート群(n=8)の4群に分けた。ドライアイスで冷やしたアルミ棒を膀胱へ接触させて筋原性膀胱低活動モデルを作製した。凍結障害後3日目に凍結障害部位にASCシートを貼付した。シート貼付後7日目に膀胱内圧測定、膀胱のRT-PCRと病理組織学的検査を行った。さらにASCシートの生着および分化を確認するためにgreen fluorescent protein (GFP)を発現するLewisラットからASCシートを作製し、上記と同様に凍結障害を行ったLews雌ラットに貼付した。細胞シート貼付後3日、7日、14日、21日、28日目に膀胱を摘出して免疫組織染色を行った。 膀胱内圧測定では、シート貼付群は残尿量の有意な改善を認めた。さらに凍結障害群でみられた尿溢流が、凍結障害+ASCシート群では認められなかった。RT-PCR検査では、Vascular Endothelial Growth Factor遺伝子およびHepatocyte Growth Factor遺伝子が、凍結障害+ ASCシート群では有意差をもって増加した。免疫組織染色に関して、貼付後7日目以降でGFP発現ASCシートはvWF陽性であることが示され、内皮細胞に分化したことが示唆された。本研究成果は今後、学会および学術誌での発表を予定している。
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